Ti质粒是土壤农杆菌的天然质粒,该质粒上有一段特殊的DNA区段,当农杆菌侵染植物细胞时,该DNA区段能自发转移,插入植物染色体DNA中,Ti质粒上的这一段能转移的DNA被叫做T-DNA。人们根据这一现象,将Ti质粒进行改造,将感兴趣的基因放进T-DNA区段中,通过农杆菌侵染植物细胞,实现外源基因对植物的遗传转化。 操作步骤 P...
T-DNA是能插入宿主细胞染色体的一段DNA,通过T-DNA插入,把一段T-DNA插入正常的染色体中(比如让植物感染农杆菌,插入的位置通常是随机的),如果插入的位置在某个基因内,那么这个基因可能就失去了它的作用.这样的个体就是T-DNA插入突变体.
PCR法鉴定T-DNA插入突变体 T-DNA插入 •T-DNA,转移DNA(transferredDNA)是根瘤农杆菌Ti质粒中的一段DNA序列,可以从农杆菌中转移并稳定整合到植物基因组 •将目的基因转入到经过改造的T-DNA区,借农杆菌的感染实现外源基因向植物细胞的转移与整合,获得转基因植株 •除用于转基因以外,T-DNA插入到植物基因中...
三引物法鉴定T-DNA插入突变体 Ti质粒是土壤农杆菌的天然质粒,Ti质粒上的特殊DNA区段,当农杆菌侵染植物细胞时,能自发转移并插入植物染色体DNA中,这一DNA区段被称为T-DNA。人们通过将Ti质粒进行改造,将感兴趣的基因放进T-DNA区段中,通过农杆菌侵染植物细胞,实现外源基因对植物的遗传转化。利用PCR...
拟南芥突变tdna插入pcr鉴定 拟南芥TDNA 插入突变体ATSUC3 的PCR 鉴定 拟南芥是一种常见的模式植物,广泛应用于植物遗传学和分子生物学 研究中。TDNA 插入突变体是拟南芥突变体中的一种重要类型,它们 具有基因敲除或敲低表达的作用,有助于揭示基因的功能和作用机制。 ATSUC3 是拟南芥中的一个TDNA 插入突变体,具有...
首先,在T-DNA上有一种或多种抗性基因,比如说卡那霉素,同过筛选得到T-DNA插入的突变体,然后通过多次自交确定并得到纯合体
拟南芥T-DNA插入突变体的鉴定 09生工吴超 200900140129 一、实验原理 T-DNA插入法是反向遗传学研究的重要手段。T-DNA是农杆菌的一个大质粒,长度在25kb左右。野生型农杆菌的T-DNA上带有激素合成基因,感染植物后会导致植物细胞快速增殖形成愈伤组织,失去分化能力。所以一般实验使用改造后的农杆菌——T-DNA中导入了卡...
本实验即检测所得植株是否为T-DNA的插入突变体。 1.引言 Ti质粒是土壤农杆菌的天然质粒,该质粒上有一段特殊的DNA区段,当农杆菌侵染植物细胞时,该DNA区段能自发转移进植物细胞,并插入植物染色体DNA中。Ti质粒上的这一段能转移的DNA被叫做T-DNA。若将Ti质粒进行改造,把感兴趣的基因放进T-DNA序列中,通过农杆菌...
▪ T-DNA插入到植物染色体上的什么位置,是随机的。如果 T-DNA插入某个功能基因的内部,特别是插入到外显子区, 将造成基因功能的丧失。所以利用农杆菌Ti质粒转化植物 细胞,是获得植物突变体的一种重要方法。 2021/10/10 3 3. 用PCR方法鉴定T-DNA插入纯合突变体 ▪ 农杆菌Ti质粒转化植物细胞后,在获得的后代...
1 T—DNA 插入突变体在植物基因功能研究中应用 T—DNA 插入突变体在植物基因功能研究中应用 摘要:在植物的基因克隆和功能分析研究中,有许多种策略,其中利用突变体是最常用的方法之一,但天然的突变体数量很少且难以发现,利用农杆菌介导的 T-DNA 标签法得到突变体[1]是目前研究植物功能基因组最有效、使用最广泛的手...