1. 请利用对数生长期细胞做siRNA转染实验,一般在细胞传代后24 -36 h,开始转染siRNA,可以保证转染效率。 2. 细胞密度对转染效率也具有很大的影响,请选择汇合度为30-70%的对数生长期细胞进行siRNA转染实验,可以取得较高的转染效率。细胞密度过高或过低则降低转染效率。 3. siRNA干粉溶解后请分装,并保存在-80 ℃,...
Lipofectamine ™ RNAiMAX转染主要供siRNA和Stealth ™ RNAi双链体转染使用,具有转染效率高、对细胞毒性小等优点。 转染步骤: 1.转染前准备试剂包括:Opti-MEM培养基、Lipofectamine™ RNAiMAX试剂、siRNA、不加双抗的10%FBS培养基、胰酶、PBS缓冲液等常见处理细胞的试剂。 2.细胞密度≥90%。 3.按正常处理细胞的...
siRNA 是分子中的一种短 (21-23 bp) 双链 RNA 核苷酸，在细胞中发挥各种生物系统的功能。siRNA转染 是利用小干扰RNA（siRNA）来靶向并沉默特定基因的一种技术，广泛应用于基因功能研究和疾病防治等领域。这项技术涉及将siRNA导入细胞中，从而通过RNA干扰（RNAi）机制降低靶基因的表达。为了成功优化 siRNA 转染，需要...
体内siRNA于siRNA转染技术 应用是基于纳米颗粒、聚合物或 脂质体的一种技术。科学家们发现 siRNA 在大规模沉默基因表达和研究基因功能方面比较有价值。此类实验的成功通常取决于 siRNA的转染方法。可以使用优化的 转染试剂 和试剂盒在体外和体内转染 siRNA。影响siRNA 转染效率的因素主要包括培养细胞的生长状况、转染发生...
siRNA转染实验介绍 RNA干扰(RNAi)现象是由与靶基因序列同源的双链RNA 引发的,广泛存在于生物体内的序列特异性基因转录后的沉默过程。胞质中的核酸内切酶 Dicer 将 dsRNA 裂解成由 21-25 个核苷酸组成的 siRNA,随后 siRNA 与体内蛋白结合形成 RNA 诱导的沉默复合物RISC,RISC与外源性基因表达的mRNA的同源区进行特异性...
siRNA转染实验介绍01- siRNA储存常规化学合成的siRNA序列为21～23nt的双链小分子RNA，为冻干粉形式的即用型试剂 ，在常温不溶解的情况下可以保存至少1个月时间，放置于-20℃～-80℃低温环境中，冻干粉可以稳定保存一年。02- 转染试剂储存4℃保存，不可冷冻。03-体外转染操作流程：第一步、接种细胞：建议提前一天...
在基因沉默实验中，我们更关注siRNA的沉默效果而非转染效率，因为二者并不完全相关。此外，所有的siRNA都只能保证mRNA水平的敲低，无法保证WB水平的敲低，毕竟siRNA是直接作用于mRNA发挥作用。针对qPCR检测结果不理想的情况，我们建议：1.确保所用的试剂都是RNase free，保证siRNA没有降解2.确保siRNA合成纯度，需PAGE/...
siRNA是一种21-23个核苷酸长的双链RNA,它与靶基因的mRNA序列互补,通过碱基配对原则与mRNA结合,抑制基因表达。siRNA转染实验是通过将siRNA转入细胞内,利用细胞内自然存在的RNA干扰机制,在转录后水平抑制基因表达。这种技术具有高效性、特异性和可逆性等特点,被广泛应用于基因功能研究、药物筛选和疾病治疗等领域。 二、所...
在进行siRNA转染实验之前，准备好所需的试剂和材料是确保实验顺利进行的关键步骤。以下是主要的实验准备工作：1.关键试剂与材料：siRNA序列：设计针对目标基因的siRNA序列至关重要。你可以选择购买商业化的siRNA，也可以使用在线工具进行序列设计，确保siRNA与目标mRNA高度互补。为了避免脱靶效应，设计时应注意特异性。通常，...
简化转染方案 传统上,siRNA 转染是一个为期两天的程序,使优化过程相对缓慢。研究人员开发了 siPORT NeoFX 转染试剂以优化 siRNA 转染方案。siPORT NeoFX 脂质体制剂可用于在胰蛋白酶处理后立即高效转染贴壁细胞,不会增加细胞毒性。只需向稀释的 siRNA 中加入 siPORT NeoFX,孵育后形成转染复合物,向培养...