1、转染效率的问题。虽然siRNA可以转入细胞内，但是由于转染效率低，进入细胞的siRNA太少，无法发挥正常功能。2、检测时间点。 建议转染后24-48 h检测基因水平变化，48-72 h检测蛋白水平变化。3、推荐RT-PCR的引物应该设计在target位置的两侧，而不是同侧。4、RNA降解，建议-20℃保存，溶解后要最小量...
应该是转染效率太低了，转染效率低导致进入细胞的siRNA比较少，刺激细胞产生应激反应，导致目的基因不降反...
从特异性序列的设计到引物合成到干扰质粒构建抑或是病毒载体介导的siRNA或miRNA的整套技术路线都已经相对比较成熟了，而且有米的话可以直接找公司合成，当然整个过程自己动手的话分子生物学的实验技术学的东西更多。再到后续的转染或感染细胞，体系的建立很关键，若想达到很好的沉默效果，稳定转染是必要条件。总...
大神求助！！！
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