SEC-HPLC进行蛋白纯度分析时出现蛋白粘柱子是因为蛋白与柱填料发生了可逆或不可逆的相互作用,导致峰展宽、拖尾甚至不出峰等现象,影响蛋白的准确定量。为了解决这一问题,可以在流动相中添加减少相互作用的添加剂,例如提高盐浓度、添加精氨酸和有机溶剂等。
SEC-HPLC(尺寸排阻高效液相色谱)是一种基于分子大小分离的HPLC技术。它利用具有不同孔径的固定相(填料)对样品中的蛋白质进行分离,使得大分子先于小分子通过色谱柱,从而实现蛋白质的分离和纯度分析。 二、HPLC蛋白纯度分析原理 HPLC蛋白纯度分析的原理基于蛋白质在移动相(溶剂)中通过固定相(色谱柱填料)时的相对迁移速率。
高效SEC-HPLC是一种可靠、准确的蛋白质纯度检测方法，对于生物药物研发和质量控制具有重要意义。通过优化和改进SEC-HPLC方法，我们可以提高蛋白质纯度分析的准确性和灵敏度，为蛋白质研究和生物药物开发提供可靠的数据支持。在进行高效SEC-HPLC分析时，科研人员应综合考虑样品特性和实验要求，并遵循最佳实践指南以确保结果的...
在变性 SEC-HPLC分析的情况下,由于SDS的存在,多聚体含量则与非还原CE-SDS的分析结果基本一致。所以与非还原 CE-SDS相比, SEC-HPLC可更加客观地评价样品中总多聚体的百分比含量。该研究分析的单抗样品多聚体主要是以非共价键的形式连接,所以应注意两种方法所得到的多聚体含量结果具有不同的含义,在分析多聚体含量...
SEC-HPLC是一种常用的蛋白质纯度检测方法,通过分析蛋白质样品在凝胶柱中的分离情况,可以评估样品的纯度。在进行SEC-HPLC检测时,需要准备好合适的设备和试剂,进行样品制备和注射,设置合适的流动相条件和检测器参数,最后进行数据分析和结果解释。这个方法在生物科技和药物研发领域中具有广泛的应用。
高效SEC-HPLC是一种可靠、准确的蛋白质纯度检测方法,对于生物药物研发和质量控制具有重要意义。通过优化和改进SEC-HPLC方法,我们可以提高蛋白质纯度分析的准确性和灵敏度,为蛋白质研究和生物药物开发提供可靠的数据支持。在进行高效SEC-HPLC分析时,科研人员应综合考虑样品特性和实验要求,并遵循最佳实践指南以确保结果的准确...
高效SEC-HPLC是一种可靠、准确的蛋白质纯度检测方法,对于生物药物研发和质量控制具有重要意义。通过优化和改进SEC-HPLC方法,我们可以提高蛋白质纯度分析的准确性和灵敏度,为蛋白质研究和生物药物开发提供可靠的数据支持。在进行高效SEC-HPLC分析时,科研人员应综合考虑样品特性和实验要求,并遵循最佳实践指南以确保结果的准确...
HPLC-SEC分析是确定治疗性蛋白质纯度的重要工具,并且在全世界范围内用作测量聚合物含量和污染物百分比(单克隆抗体制造过程)的标准方法。 鉴于蛋白质的完整性——在这种情况下,单克隆抗体由于温度变化、机械应力影响、pH波动和生产过程中以及整个生命周期中的紫外线照射的影响而受到威胁(另见[3]),因此,建立确定单克隆...
抗体纯度测定主要面临两方面挑战：有效分离抗体分子与杂质及对主蛋白与杂质的高灵敏检测。紫外、荧光、电化学及质谱等检测器常用于此，为确保结果的准确性，通常采用两种分离方法。SEC-HPLC（凝胶排阻高效液相色谱）和CE-SDS（凝胶电泳-十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳）是两种常用的分析手段，它们在抗体大小...
目的:建立检测重组人透明质酸酶(rHuPH20)纯度的高效分子排阻色谱法(SEC-HPLC).方法:利用SEC-HPLC法建立检测rHuPH20纯度的方法,并对方法的专属性,线性,精密度(重复性和中间精密度),检测限,定量限和耐用性等指标进行评估.结果:空白溶剂在设定的积分范围内无特异峰出现;样品浓度为30～480 μg/mL时,数据呈线性...