1.系统平衡:使用与样品稀释相同的缓冲液,平衡SEC-HPLC系统,直到基线稳定。 2.加载样品:通过自动进样器或手动方式,将准备好的样品加载到色谱系统中。 3.洗脱和检测:以恒定的流速通过色谱柱,蛋白质将根据其大小依次洗脱,并通过检测器(通常为紫外检测器)记录洗脱曲线。 六、HPLC纯度检测注意事项(SEC-HPLC) 1.色谱...
五、超宽孔径SEC检测LNP-mRNA聚集体 在SEC色谱中，Cre mRNA 标准品洗脱峰在30.08min（黑色），而各种 LNP 洗脱峰在 24.39 至 25.43 min之间（蓝色、橙色和绿色）。这说明SEC可以把完整的LNP与游离的LNP分离开来。有意思的是，不同批次的LNP1、LNP2及LNP3拥有不同的洗脱峰时间。结合Fab片段的LNP-B/C要比...
Messenger RNA, and Lipid Nanoparticle Aggregates Using an Ultrawide Pore Size Exclusion Chromatography Column》,他们采用低吸附超宽孔径排阻色谱 (SEC)检测质粒原液、mRNA原液及mRNA-LNP制剂中的聚集体。具体
SEC-HPLC进行蛋白纯度分析时出现蛋白粘柱子是因为蛋白与柱填料发生了可逆或不可逆的相互作用，导致峰展宽...
通过优化SEC-HPLC方法，我们可以提高蛋白质纯度的测定精度和灵敏度，为蛋白质研究和生物药物开发提供有力支持。1.高效SEC-HPLC的原理 高效SEC-HPLC利用分子筛柱对蛋白质进行分子大小的分离，从而实现对蛋白质纯度的检测。较大分子量的蛋白质会较快地通过柱床，而较小分子量的杂质则会滞留更长时间。通过检测样品中...
高效SEC-HPLC是一种可靠、准确的蛋白质纯度检测方法,对于生物药物研发和质量控制具有重要意义。通过优化和改进SEC-HPLC方法,我们可以提高蛋白质纯度分析的准确性和灵敏度,为蛋白质研究和生物药物开发提供可靠的数据支持。在进行高效SEC-HPLC分析时,科研人员应综合考虑样品特性和实验要求,并遵循最佳实践指南以确保结果的准确...
SEC-HPLC是一种常用的蛋白质纯度检测方法,通过分析蛋白质样品在凝胶柱中的分离情况,可以评估样品的纯度。在进行SEC-HPLC检测时,需要准备好合适的设备和试剂,进行样品制备和注射,设置合适的流动相条件和检测器参数,最后进行数据分析和结果解释。这个方法在生物科技和药物研发领域中具有广泛的应用。
一、高效SEC-HPLC的原理 高效SEC-HPLC利用分子筛柱对蛋白质进行分子大小的分离,从而实现对蛋白质纯度的检测。较大分子量的蛋白质会较快地通过柱床,而较小分子量的杂质则会滞留更长时间。通过检测样品中蛋白质的峰形和相对峰面积,可以评估蛋白质纯度的高低。
四、超宽孔径SEC检测mRNA聚集体 研究人员采用超宽孔径SEC原型色谱柱检测来自不同供应商的 EGFP mRNA。与供应商 A 相比,供应商 B 的样品在 31.26 min 的EGFP mRNA面积明显减少。此外,供应商 B 的样品在17.25 至 30.20min位置显示出更多的聚集体(59.7% vs 17.8%)。供应商 B 的样品主峰位置在 37.39 min,对应...
四、超宽孔径SEC检测mRNA聚集体 研究人员采用超宽孔径SEC原型色谱柱检测来自不同供应商的 EGFPmRNA。与供应商 A 相比,供应商 B 的样品在 31.26 min 的EGFP mRNA面积明显减少。此外,供应商 B 的样品在17.25 至 30.20min位置显示出更多的聚集体(59.7% vs 17.8%)。供应商 B 的样品主峰位置在 37.39 min,对应的...