1、免疫球蛋白可能过度表达,导致分子量大于正常。2、免疫球蛋白可能有多个亚基结构,导致分子量偏大。3、免疫球蛋白的抗原可能太小,导致分子量偏大。sdspage是聚丙烯酰胺凝胶电泳,PAGE聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)是以聚丙烯酰胺凝胶作为支持介质的一种常用电泳技术,用于分离蛋白质和寡核苷酸。
PAGE根据其有无浓缩效应,分为连续系统和不连续系统两大类。前者电泳体系中缓冲液pH及凝胶浓度相同,带电颗粒在电场中的泳动主要靠电荷和分子筛效应;后者电泳体系中缓冲液离子成分、、凝胶浓度及电位梯度是不连续的,带电颗粒在电场中的泳动不仅主要靠电荷和分子筛效应,还有浓缩效应。PAGE所具有的分子筛效应、浓缩效应...
在SDS-PAGE不连续电泳中,制胶缓冲液使用的是Tris-HCL缓冲系统,浓缩胶是pH6.7,分离胶pH8.9;而电泳缓冲液使用的Tris-甘氨酸缓冲系统.在浓缩胶中,其pH环境呈弱酸性,因此甘氨酸解离很少,其在电场的作用下,泳动效率低;而CL离子却很高,两者之间形成导电性较低的区带,蛋白分子就介于二者之间泳动.由于导电性与电场强度...
SDS-PAGE电泳条带跑偏了,相邻蛋白条带跑在一起了,什么原因造成的? 1.5万 1 0:56 App 为什么SDS-PAGE电泳前要煮蛋白呢? 3835 1 4:15 App Western Blot实验指南(001-SDS-PAGE) 2838 -- 1:11 App SDS-PAGE电泳分辨率不高,有什么办法可以优化? 5174 1 0:51 App SDS-PAGE电泳凝胶的浓度大小对蛋白迁移...
上样缓冲液的作用:形成SDS-蛋白复合物,使其带负电;SDS和巯基乙醇使蛋白质解离,综上两点为了在电泳中,只根据分子量来分离。 SDS作用:去蛋白质电荷、解离蛋白质之间的氢键、取消蛋白分子内的疏水作用、去多肽折叠,还有助溶剂的作用。 2.SDS-PAGE电泳凝胶中各主要成分的作用 (1)浓缩与分离胶凝固的好坏直接关系到电...
sds-page电泳泳道一般不会很宽的,因为用来形成泳道的梳子都是固定大小的,只有电泳时条带可能会变的很宽 这个是因为上样体积比较大的时候,比如上满整个泳道的时候,因为浓缩胶体积小,未能将样品完全压成一条线,在分离胶的时候条带就容易扩散。所以电泳时条带可能会变的很宽 另外就是电流电压的影响...
1. SDS-PAGE胶蛋白电泳后,部分条带上下粗细不均,出现上粗下细的现象,见下图箭头所指。 2. 转膜后,PVDF膜上出现大量象食盐一样的细小颗粒(决非气泡),照片照得不是太好,显得颗粒过大,实际上就象一颗一颗的细盐颗粒密集分布。 不知大家如何解决这两个问题的,谢谢!
Quantifying bands on SDS-PAGE using ImageJ ImageJ软件处理SDS PAGE条带方法kiyamaharuo 立即播放 打开App,流畅又高清100+个相关视频 更多47.5万 371 2:33 App 把一只大蜘蛛和200只蚂蚁关一起!会发生什么事? 27.2万 565 2:32 App 把一只豆青虫扔进漂白水!会发生什么事? 2684 -- 22:59 App 听风的蚕:...
对于蛋白纯化中SDS-PAGE跑胶问题,小编是有发言权的。对于当时还是蛋白纯化小白的小编来说,这个 “坑”反复跳了半学期才逐渐发现问题(哭死~)。为什么这么久才发现,一方面自己做实验反应较迟钝,另一方面网上也没有一个说明白的,只能从网络夹缝中查到那么一点点看上去合理的信息。那么,话不多说,上干货。
1、SDS-PAGE蛋白电泳配胶不凝固怎么办? (1)可多加过硫酸铵试试 (2)可多加点TEMED来加速凝固 (3)配好胶后放在温箱里凝的快些,环境温度低会影响凝的速度。在冬天灌好胶后放在培养箱里,一般情况下很快就凝了,可以提高效率。 (4)经常出现浓缩胶凝但不成形,非常粘,这是因为C液(浓缩胶缓冲液)的pH值不对,...