出现图1-3这种样本挂孔,条带拖尾、弥散现象,主要原因在于以下几个方面: 1)原因一:上样浓度问题 样本重度挂孔、拖尾、弥散,首先考虑上样浓度问题,浓度太高80%会出现样本挂孔拖尾现象,样本沉淀在加样孔上。对于诱导表达后的菌液来说,OD值一般都会大于2.0,直接菌液离心重悬煮样上SDS,就会出现挂孔现象,挂空滤百分...
1). 电泳中,只有在恒压的条件下电泳期间蛋白质才可以保持恒定的迁移速率。 2). 电泳时出现不规则的迁移条带的原因多是电流不稳定。因此,要确保上下电泳槽中的电泳液与凝胶保持良好的接触。其他可能的原因包括:加样孔中加入的样品太多;样品中盐浓度太高;边缘效应。在凝胶边缘,迁移条带出现“微笑”状或样品迁移速...
在跑SDS-PAGE时,需要点Marker,正常情况在染色、脱色后能至少看到Marker的条带.如果Marker都没有,那就是电泳问题了. 分析总结。 现在还有一个问题就是在电泳快结束的时候蛋白的条带会变黄连缓冲液也会有黄色的杂质结果一 题目 SDS-PAGE电泳跑不出条带现在在做SDS-PAGE电泳,用考马斯亮蓝R250染色,染色后就能看到条...
倒数第二条带是烟草全蛋白的，怎么也只有那么几条，还很弱，跑电泳的操作我感觉已经可以了，不知道...
SDS-PAGE 条带问题作者 氢化大雪 来源: 小木虫 650 13 举报帖子 +关注 表4 SDS-PAGE凝胶配方 组分12%分离胶(30ml) 4%浓缩胶(15ml) 双蒸水 10.05 9.15 30%Acrylamide 12 1.95 1.5M Tris-HCl(PH 8.8) 7.5 - 0.5M Tris-HCl(PH 6.8) - 3.75 10% SDS 0.3 0.15 10%过硫酸铵 0.15 0.075 TEMED 0.015...
第一:跑出来的胶有很多的横着竖着的条带,不知道是蛋白没有分开还是怎么的.看Bio-Rad上面写的问题分析说可能是蛋白被污染了,所以加了DNAse I和RNase A在最开始的蛋白里面,不过效果还是不好,依然有很多条带.第二:把第一条strip放在成品胶(SDS-PAGE的那个胶)顶部,用琼脂(agarose)凝固了2个小时,然后再跑SDS-...
跑的时间太长了，到最后跑到一起了，最好在指示剂到下沿时就停止电泳，或者电压太高，换小点的试试
小弟最近在做SDS-PAGE,发现了一些问题1.胶凝固后会缩一点点,导致加样孔变浅2.两边的两个孔加样后跑出来的条带不直不知是否正常,如果不正常问题可能是什么原因造成的不要复制长编大论,电泳的书我有因为我做的是不连续电泳,而且是薄胶,最后加胶都是满出来的,没加封胶面的液体,所以一缩水加样孔就很小了....
【求助】SDS-PAGE 条带分层问题 条件:浓缩胶80V,分离胶160V. 蛋白样品浓度是0.25mg/ml,上样量35ul, 结果:有时候跑成如(图一)的样子,也有跑的好的时候(图二) 另外,同样的条件下,蛋白浓度若是1mg/ml,上样量10ul,条带从来都很正常的 请教:条带跑成图一的样子是怎么引起的?
marker跑得怎么样，正常吗？marker正常就是你样品的问题，或者处理的问题 marker也跑下去了，就是胶的问题，可能是浓度太稀了