在印迹之前分离复杂蛋白混合物常用方法是一维(1-D)十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE),其根据蛋白质分子量进行分离。在一些特殊情况下,需要天然非变性的目的蛋白,则需要使用非变性电泳进行分离。除了常用的1-D凝胶电泳,二维(2-D)凝胶电泳是...
产品说明:SDS-PAGE 蛋白上样缓冲液,是一种以溴酚蓝为染料的2倍浓液的蛋白上样缓冲液,试剂中含有SDS,DTT,甘油,溴酚蓝,Tris-HCL缓冲液等,可用于常规的SDS-PAGE变性蛋白样品上样。使用方法:1.按 1 体积蛋白样品加入 1 体积蛋白上样缓冲液即 1:1的比例,混合蛋白样品和蛋白上样缓冲液(2×)。经100℃水浴加热...
在大肠杆菌表达纯化外源蛋白的实验中,SDS-PAGE更是必不可少的操作,其通常用于检测蛋白的表达情况(表达量,表达分布),以及分析目的蛋白的纯度等。 SDS-PAGE作用机理 蛋白中含有很多的氨基(+)和羧基(-),不同的蛋白在不同的pH值下表现出不同的电荷,为了使蛋白在电泳中的迁移率只与分子量有关,我们在上样前,通常...
产品说明:SDS-PAGE 蛋白上样缓冲液(SDS-PAGE Sample Loading Buffer,1×),是一种经过改良的以溴酚蓝为染料的蛋白上样缓冲液。可以直接用于细胞或组织样品的裂解,并用于后续常规的SDS-PAGE 蛋白样品的上样。使用 SDS-PAGE 蛋白上样缓冲液(1×)直接裂解蛋白样品的优点是比较便捷;缺点是裂解好的蛋白样品不能用常规...
不连续SDS—PAGE测定蛋白质变性实验操作 原理：蛋白质是两性电解质在一定的PH条件下解离而带电。当溶液的PH大于蛋白质的等电点（PI）时，蛋白质本身带负电，在电场中将向正级移动；当溶液的PH小于蛋白质的等电点时，蛋白质带正电，在电场中将向负极移动；蛋白质在特定电场中移动的速度取决于其本身所带的静电荷...
形成带负电荷的SDS-蛋白质复合物，这种复合物由于结合大量的SDS，使蛋白质丧失了原有的电荷状态形成仅保持原有分子大小为特征的负离子团块，从而降低或消除了各种蛋白质分子之间天然的电荷差异，由于SDS与蛋白质的结合是按重量成比例的，因此在进行电泳时，蛋白质分子的迁移速度取决于分子大小。
1.2SDS-PAGE凝胶配制 1.2.1配胶前准备 首先强调一下,一块好的胶是跑好蛋白的前提,所以这个环节也不容忽视。玻璃板的选择,一种是1.0毫米厚度的,另一种是1.5毫米的,这个厚度选择也是有讲究的,如果上样体积小于10微升,优先选1.0毫米,否则选1.5毫米的。原因是什么?答案在转膜部分揭晓。还有分离胶的浓度也要选择适...
产品名称:SDS-PAGE蛋白上样缓冲液(变性)(1×) 产品货号:ZN1876 产品规格:10ml 产品保存:-20℃保存,一年有效 产品说明:SDS-PAGE 蛋白上样缓冲液(SDS-PAGE Sample Loading Buffer,1×),是一种经过改良的以溴酚蓝为染料的蛋白上样缓冲液。可以直接用于细胞或组织样品的裂解,并用于后续常规的SDS-PAGE 蛋白样品的...
杂带主要原因可能是抗体特异性问题，你可以通过调节抗体稀释浓度，蛋白上样量，曝光时间等等条件试图降低杂带。不可能是变形不彻底所致。再者，如果你的蛋白发生降解（特异位点），那么同样也会有杂带，这样情况避免方法可能在蛋白溶液中加入蛋白酶抑制剂，EDTA等药品试图改变 ...
SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(简称SDS-PAGE),也叫变性聚丙烯酰胺凝胶电泳,是以聚丙烯酰胺凝胶作为支持介质的一种含有蛋白变性剂SDS(十二烷基硫酸钠)的常用电泳技术,常用于检测蛋白质。 聚丙烯酰胺凝胶是由一定量的丙烯酰胺和甲叉双丙烯酰胺聚合成的三维网状结构。SDS-PAGE一般采用不连续凝胶系统,即含有不同孔径的两层凝胶:上...