https://www.xuetangx.com/learn/sysuP10070118/sysuP10070118/10372101/video/17700782?channel=i.area.manual_search, 视频播放量 520、弹幕量 0、点赞数 13、投硬币枚数 2、收藏人数 28、转发人数 6, 视频作者 分子细胞生化, 作者简介 一个沉迷于生命科学研究的在校生,
Western blotting is an important analytical technique used in cell and molecular biology for last four decades. It involves separation of proteins in SDS-PAGE and then transfer of proteins to a membrane followed by detection. By using a western blot, one can identify specific protein from a ...
因此，SDS-PAGE和Western blot虽然都涉及到SDS和聚丙烯酰胺凝胶，但它们在应用上有明显区别。SDS-PAGE主要用于蛋白质的分离，而Western blot则侧重于特定蛋白质的检测。两者结合使用可以更全面地分析蛋白质。在SDS-PAGE过程中，蛋白质被赋予相同的电荷密度，使得分子大小成为决定其迁移率的关键因素。而在Weste...
免疫荧光、SDS-PAGE、Western-blot实验技术 免疫荧光技术SDS－聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）Westernblotting实验技术 一、免疫荧光技术 基本原理：免疫荧光技术是根据抗原抗体反应的原理，先将已知的抗原或抗体标记上荧光素，制成荧光抗体，再用这种荧光抗体（或抗原）作为探针检测组织或细胞内的相应抗原（或抗体）。在...
SDS-PAGE及WesternBlot简明操作指南 SDS-PAGE及Western Blot简明操作指南 ⼀．蛋⽩样品制备 推荐使⽤RIPA裂解液。⼀般使⽤强裂解液，对于coIP可⽤弱裂解液。1.准备⼯作：1)取⾜量裂解液，加⼊PMSF和（或）蛋⽩酶抑制剂；若要检测蛋⽩磷酸化，推荐加 ⼊磷酸酶抑制剂。置于冰上预冷。2)准备...
原核表达,SDS-PAGE,Western-Blot 原核表达 将克隆化基因插入合适载体后导入大肠杆菌用于表达大量蛋白质的方法一般称为原核表达。这种方法在蛋白纯化、定位及功能分析等方面都有应用。大肠杆菌用于表达重组蛋白有以下特点:易于生长和控制;用于细菌培养的材料不及哺乳动物细胞系统的材料昂贵;有各种各样的大肠杆菌菌株及与之...
不像组织切片HE染色, 免疫组化和免疫荧光那样可重复(见本人另一文章石蜡切片和冰冻切片之高质量HE染色、免疫组化、免疫荧光染色),Western blot常常被我们叫做"玄学",因为这门技术让人琢磨不透,很难做到结果可重复,明明上了相同体积的同个样品,可常常出现复孔的条带趋势不一致。然而,经过笔者硕士期间反复用心琢磨,...
SDS-PAGE凝胶电泳及Westernblot检测技术 SDS-PAGE凝胶电泳 实验原理实验步骤注意事项电印迹SDS-PAGE的优点SDS-PAGE的缺点实验常见问题及处理小技巧 实验原理 背景基本原理分类分离范围实验中各成分作用 背景 1967年由Shapiro建立。1969年由Weber和Osborn进一步完善。他们发现样品介质和丙烯酰胺凝胶中加入离子去污剂（SDS）以后...
(1)当我们把混合样品通过SDS-PAGE电泳分离之后,理论上可以通过所得条带的分子量来鉴定目的蛋白是否存在,但是这种鉴定受到很多因素的干扰,非常不准确。因此我们需要进一步使用Western blot (蛋白质印迹法)来鉴定血清中的IgG含量的多少。 凝胶上的蛋白质条带
一、蛋白质SDS-PAGE电泳 1、安装垂直板电泳装置 用洗洁精、清水和无水乙醇清洗两块玻璃板,晾干后安装。 2、制备SDS-聚丙烯酰胺凝胶 (1)配制9%分离胶(15ml):双蒸水 6.55ml,1.5M Tris-HCl(pH8.8)3.75ml,30%丙烯酰胺储存液(Acry/Bis)4.5ml,10%SDS 150ml,10%过硫酸铵(APS)50ml,混匀后加入3.75ml TEMED,...