100 μL、10 % SDS 100 μL和TEMED 5 μL充分混匀后灌胶。 5 % SDS-PAGE 浓胶:30%丙烯酰胺0.5 mL、去离子水2.1 mL、0.5mol/L Tris-HCl(pH6.8)0.375 mL、10 % AP 30 μL、10 % SDS 30 μL和TEMED 5 μL充分混匀后灌胶。 考马斯亮蓝染色液的配制:称取1 g考马斯亮蓝R-250,置...
7.5,用去离子水定容至 100mL 备用。 银染固定液:30 % 的乙醇,10%的乙酸。 银染氧化液:称取 0.7 g 高碘酸溶于 100 mL 去离子水,充分混匀备用。 银染显色液:浓度为 0.005 g/L 的柠檬酸,0.02 %的甲醛。 银氨溶液:浓度为 0.67 % 的硝酸银,0.33 %的氨水,0.8 g/L 的 NaOH。©...
银氨染色用凝胶染色液 取上述试剂加入100 ~ 200 mL的试剂瓶中,均匀混合。该溶液应为无色透明状。如果氨水浓度过低时溶液会呈混浊状,此时应补加浓氨水直至透明。本染色液应现用现配,不宜保存。 银氨染色用显影液 SDS-PAGE凝胶配方 1)根据目的蛋白的分子量大小选择合适的凝胶浓度,再按照下面的表格配制SDS-PAGE的...
SDSPAGE操作方法要点 SDS-PAGE教程 1 SDS-PAGE原理 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳，是在聚丙烯酰胺凝胶系统中引进SDS（十二烷基硫酸钠）， SDS会与变性的多肽，并使蛋白带负电荷，由于多肽结合SDS的量几乎总是与多肽的分子量成正比而与其序列无关，因此SDS多肽复合物在丙稀酰胺凝胶电泳中的迁移率只与多肽的大小有关，在...
目的:初步分析嗜人按蚊中肠膜蛋白组分.方法:采用SDS-PAGE以及银氨染色法检测嗜人按蚊中肠膜蛋白分子量,并对分子量标准(Mr116000～14400)进行直线回归分析.结果:嗜人按蚊中肠粗蛋白(C带)上有8条主带,而膜蛋白(B带)上有4条主带.Marker标准直线回归系数为-0.9814.通过电泳迁移率计算,得出膜... 查看全部>> ...
5 % SDS-PAGE 浓胶:30%丙烯酰胺 0.5 mL、去离子水 2.1 mL、0.5mol/L Tris-HCl(pH6.8)0.375 mL、10 % AP 30比、10 % SDS 30(和TEMED 5 L.充分混匀后灌胶。考马斯亮蓝染色液的配制 :称取 1 g 考马斯亮蓝R-250 ,置于1 L 烧杯中;量取250 mL 异丙醇加入上述烧杯中,搅拌溶解;加入 100 mL 的...
银氨染色用显影液 【组分浓度】%(w/v)柠檬酸,%(v/v)甲醛 名称 柠檬酸 甲醛 去离子水 用量50mg 备注 定容至 1L 后充分混匀,室温保存 SDS-PAGE 凝胶配方 1) 根据目的蛋白的分子量大小选择合适的凝胶浓度,再按照下面的表格配制 SDS-PAGE 的分离 胶(即下层胶): 丙烯酰胺在凝胶中的百分比 5% % 10% 12%...
银氨染色用显影液 【组分浓度】% (w/v) 柠檬酸,% (v/v) 甲醛 名称 用量 备注 柠檬酸 50 mg 甲醛 mL 去离子水 定容至 1 L 后充分混匀,室温保存 SDS-PAGE 凝胶配方 1) 根据目的蛋白的分子量大小选择合适的凝胶浓度,再按照下面的表格配 制 SDS-PAGE 的分离胶(即下层胶): 丙烯酰胺在凝胶中的百 分离...
14、蒸储水脱色(4) 7%冰乙酸保存(要检测脱色后的胶,则需保存于7%冰乙酸中)蒸储水冲洗一 7%冰乙酸(关键步骤),10%乙醇脱色脱色液:7%冰乙酸,10%乙醇,83ml蒸储水7%冰乙酸保存(蒸储水冲洗后用7%冰乙酸保存且约二四天后再照胶,条带更为清晰)银氨染色用凝胶固定液(质谱用)【组分浓度】50% (v/v)甲醇,10...
银氨染色用显影液【组分浓度】0.005% (w/v)柠檬酸,0.02% (v/v)甲醛名称用量备注柠檬酸 50 mg 甲醛 0.2 mL 去离子水定容至1L后充分混匀,室温保存 SDS-PAG凝胶配方 1)根据目的蛋白的分子量大小选择合适的凝胶浓度,再按照下面的表格配制 SDS勺分离胶(即下层胶):丙烯酰胺在凝胶中的百分比分离胶最佳分离范围 ...