SDS-PAGE 银染步骤1. 电泳完成后,用超纯水洗胶2次,每次洗涤5分钟。 2. 固定:将凝胶浸泡在 25 ml 的固定液中,固定液充分覆盖胶。放于摇床上室温摇动 15 分钟。更换固定液,重复一次。固定液的配制:超纯水:乙醇:冰醋酸=6:3:1. 3. 固定完成后,配制 10%乙醇,洗胶 2 次,每次洗涤 5 分钟。 4. 再用超...
4. 重复步骤3; 5. 弃去乙醇,加10倍体积的纯水(去离子水),室温下平缓摇动10 min; 6. 重复步骤5两次; 7. 弃去清洗用水,加5倍体积的硝酸银溶液,室温下平缓摇动30 min; 8. 弃去硝酸银溶液,用纯水(去离子水)漂洗凝胶两面,每面20 s; 9. 加5倍体积的新鲜显影液,室温下平缓摇动,数分钟内出现蛋白质的染色...
SDS-PAGE电泳操作流程—含考染银染碘染.docx,1 SDS- 操作流程——考染 1、预备溶液 30% 30%聚丙烯酰胺溶液 30%〔w/v〕Acrylamide 【组分浓度】 各种组分名称 各种组分名称 30%Acr-Bis(29:1) 29%Acrylamide( 丙烯酰胺) 1%BIS(N,N’-亚甲丙烯酰 胺) 配制不同体积所需各成分的
5.银染凝胶 6.凝胶显色 7.中止显色 8.拍照 SDS-PAGE银染实验 一、实验原理 银染是一种检测聚丙烯酰胺凝胶中蛋白质的方法,其原理是银离子在碱性pH环境下被还原成金属银,沉淀在蛋白质的表面上显色。 二、实验目的 银染的灵敏度很高,可染出胶上低丰度的蛋白质 三、实验结果展示 四、服务内容及流程 1.处理样本...
1、实验介绍 在聚丙烯酰胺凝胶系统中,加入一定量的十二烷基硫酸钠( SDS),使蛋白样品与SDS结合形成带负电荷的复合物,由于复合物分子量的不同,在电泳中反应出不同的迁移率。根据标准样品在该系统电泳中所作出…
(三)银染:(每步戴手套) 1. 少量水洗胶二次,固定30min以上。 2. 少量水洗胶二次,浸泡液处理30min。 3. 水洗五分钟一次,共三至四次。振荡,去除戊二醛的非特异性结合。 4. 银溶液染色20min。 5. 少量水洗胶,显色液显色轻摇,直至出现清晰条带(若显色液变黑...
银染 试剂: 1、1%乙酸 2、显影液:2.5%的碳酸钠和0.02%甲醛的水溶液,新鲜配置 3、30%乙醇 4、固定液:Ethanoh:glacial acetic acid:H2O(30:10:60) 5、硝酸银溶液:现配现用,将20%AgNO3稀释成0.1% 步骤: 1、将凝胶泡在至少5倍体积的固定液中,室温下4-12h 2、去掉固定液,将胶泡在至少5倍体积的30%乙醇...
SOP SDS-PAGE银染标准操作规程.doc,题目: SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳银染实验流程 目的:为了使员工迅速掌握SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳银染实验而编写的操作过程。 范围:成员 负责部门:QC Quality Assurance Department 姓名 签字 日期 起草人: 批准人: QA: 生效日期: 概要 1
弃去固定液,加至少5倍体积的漂洗液,室温,在摇床上平缓摇动20min,此步骤重复三次。 弃去漂洗液,加至少5倍体积的致敏液,室温,在摇床上平缓摇动3min。 弃去致敏液,加至少5倍体积的水,室温,在摇床上平缓摇动3min,此步骤重复3次。 SOP SDS-PAGE银染标准操作规程 来自淘豆网www.taodocs.com转载请标明出处. ...
SDS-PAGE(sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis)测定蛋白质分子量,简便、快速且重复性好,是一种常用的蛋白质分子量测定方法。广州如期生物技术有限公司提供基于SDS-PAGE或质谱的蛋白质分子量测定服务。 SDS-PAGE SDS-PAGE即十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳,是一种间断的电泳系统,通常用于分离分子量...