3. 配制分离胶溶液：• 在干燥、干净的烧杯中按照配方表中的比例混合水、30%丙烯酰胺、1.5 M Tris-HCl (pH 8.8)、10% SDS、10% APS 和 TEMED。TEMED必须是最后 加入的成分。• 搅拌均匀后，立即倒入组装好的玻璃板中，确保均匀分布。• 用水或异丙醇覆盖凝胶表面，以保持均匀的表面，室温下凝固...
SDS-PAGE配制方法 10%（W/V, g/ml）过硫酸铵（APs）的配制：（100 ml）1. 称取10g过硫酸铵；2. 加入100 ml的去离子水，将固体粉末彻底溶解；3. 贮存于4℃。注意：10%过硫酸铵最好现配现用，配好的溶液在4℃保存可使用2周左右，过期会失去催化效果。5×Tris-Glycine电泳缓冲液的配制：（1 L）1. ...
一、胶溶液配方：1. 30%（w/v）丙烯酰胺（acrylamide）溶液 - 在称量瓶中称取30g丙烯酰胺，并用蒸馏水调至100ml。搅拌溶解直至均匀。-这是制备聚丙烯酰胺凝胶的基础溶液。2. 响应稀释液（Response diluent）-用于稀释聚丙烯酰胺溶液以获得不同浓度的凝胶。-可通过将聚丙烯酰胺溶液与水按1:3体积比混合来制备响应...
4、制备分离胶(下层胶) 按照配方表依次加入相应体积的试剂(1.0mm玻璃板一块胶总体积5.0ml,1.5mm玻璃板一块胶总体积7.5ml足矣),加完SDS后加APS前可以先混匀,然后迅速加入APS和TEMED,马上混匀(手摇或者振荡器摇匀),灌胶,注意胶的高度,要留有足够的空间给压缩胶,一般压缩胶的深度要求是梳子下缘再往下1厘米左右。
在实验室中,SDS-PAGE(十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳)是一种常用的蛋白质分离技术。今天,我们将深入探讨SDS-PAGE预混胶的配方,以及如何使用不同的染色方法。📖 预混胶配方指南 分离胶的百分比(如6%、10%等)是根据丙烯酰胺含量来确定的。其他成分包括Tri浓度为0.375M,SDS浓度为0.1%,TEMED和APS作为促凝剂,...
0.01 MNaOAc (pH5.2)参照此配方配制。 5×Tris-Glycine Buffer(SDS-PAGE电泳缓冲液) 组分浓度:0.125 M Tris, 1.25 M Glycine, 0.5%(W/V) SDS 1.称量下列试剂置于烧杯中。 2.加入约900 ml去离子水搅拌溶解。 3.定容至1L,室温保存。 (参照《分子克隆》二...
SDS-PAGE全部试剂配方 SDS-PAGE试剂配方 30%凝胶贮液（150ml， 4℃保存）29.2% Acr：43.8g 0.8% Bis：1.2g 将Acr完全溶解于120ml水中，再加入Bis使其完全溶解，加ddH2O定容至150ml，用滤纸过滤溶液，棕色玻璃瓶中4℃保存。分离胶Buffer （1.5M Tris-HCl 250ml）Tris：45.4725g SDS：1g 将Tris...
sds-page配方 SDS-PAGE 电泳 8%分离胶5ml 7.5ml 10ml H2O 2300（微升，下面都一样）3450 4600 30%Acrylamide 1300 2025 2700 1.5M Tris-HCl (Ph8.8) 1300 1875 2500 10%SDS 50 75 100 10%过硫酸铵50 75 100 TEMED 3 4.5 6 12%分离胶5ml 7.5ml 10ml H2O 1600 2475 3300 30%Acrylamid...