6. 拔梳子后泳道有胶丝：• 原因：TEMED 用量过多。• 解决方案：减少TEMED用量，确保在插梳子前胶未部分凝固。7. 拔梳子后泳道歪斜：• 原因：梳子与玻璃板不匹配。• 解决方案：确保梳子与玻璃板匹配，必要时更换。8. 上层胶中电泳出现“漏样”：• 原因：玻璃板与胶局部分离，上样缓冲液问题
按照配方表依次加入相应体积的试剂(1.0mm玻璃板一块胶总体积5.0ml,1.5mm玻璃板一块胶总体积7.5ml足矣),加完SDS后加APS前可以先混匀,然后迅速加入APS和TEMED,马上混匀(手摇或者振荡器摇匀),灌胶,注意胶的高度,要留有足够的空间给压缩胶,一般压缩胶的深度要求是梳子下缘再往下1厘米左右。然后用95%酒精压胶,注意...
SDS-PAGE 1、SDS-PAGE:聚丙烯酰胺凝胶电泳 2、Acr:丙烯酰胺;配胶时用30%Acr(质量比Acr:Bis=29:1) 3、Bis:甲叉双丙烯酰胺 4、DDW:超轻水 5、SDS:十二烷基硫酸/磺酸钠,阴离子去污剂(配胶时用10%) 6、APS:过硫酸铵NH4S2O4配胶时用10%
SDS-PAGE凝胶配方及制胶 12%分离胶 体积 试剂 5ml 8ml 10ml 15ml 25ml 30ml 60ml 90ml 120ml 30%Acr-Bis（ml）2 3.2 4 6 10 12 24 36 48 1.5M Tris-HCl PH8.8（ml）1.25 2 2.5 3.75 6.25 7.5 15 22.5 30 ddH2O（ml）1.65 2.64 3.3 4.95 8.25 9.9 19.8 29.7 39.6 ...
接下来，当浓缩胶也完全凝固后，便可开始准备上样进行电泳。在此之前，务必确保SDS-PAGE凝胶的制备工作已经全部完成，以确保电泳过程的顺利进行。1、在开始实验前，需要查询目标蛋白的分子量 以便选择适当的分离胶配方。同时，根据样品数量，计算出所需的实验用凝胶数量（通常凝胶最外侧的两个孔不上样，例如10孔凝胶...
笔者配制浓缩胶的配方如下,和市售或者有的实验室配制的胶的配方稍有出入,但在笔者实验室均使用的下述配方,使用很方便。 1)分离胶(下层胶)配制(10 mL): 2)浓缩胶(上层胶)配制(浓度为5%,5ml): 3)一般来说,7.5ml分离胶+2.5ml浓缩胶即可配制1块SDS-PAGE胶(厚度1.5mm)胶。分离胶和浓缩胶在室温下,大约需20...
SDS-PAGE分离胶配方表-及其原理 .pdf,SDS电泳原理: 聚丙烯酰胺凝胶是由丙烯酰胺 (简称 Acr) 和交联剂 N ,N’—亚甲基双丙烯 酰胺(简称 Bis )在催化剂作用下,聚合交联而成的具有网状立体结构的凝胶, 并以此为支持物进行电泳。聚丙烯酰胺凝胶电泳可根据不同蛋白质分子所
1、SDS-PAGE:聚丙烯酰胺凝胶电泳 2、Acr:丙烯酰胺;配胶时用30%Acr(质量比Acr:Bis=29:1) 3、Bis:甲叉双丙烯酰胺 4、DDW:超轻水 5、SDS:十二烷基硫酸/磺酸钠,阴离子去污剂(配胶时用10%) 6、APS:过硫酸铵NH4S2O4配胶时用10% 7、TEMED:四甲基乙二胺,促凝剂 8、Tris-Hcl:3羟基氨基甲烷盐酸缓冲液...
SDS-PAGE（Sodium Dodecyl Sulfate-Polyacrylamide Gel Electrophoresis）是一种常用的蛋白质电泳技术，用于分离和定量蛋白质。以下是制作SDS-PAGE凝胶的基本配方和制胶步骤：配方：1. 1%丙烯酰胺（Acrylamide）溶液：将3.7g丙烯酰胺和60μl N,N'-亚甲基双丙烯酰胺溶解在0.5ml双蒸水中，搅拌均匀。2. 2.5%BT(Bis-...