• 在干燥、干净的烧杯中按照配方表中的比例混合水、30%丙烯酰胺、0.5 M Tris-HCl (pH 6.8)、10% SDS、10% APS 和 TEMED。TEMED必须是最 后加入的成分。• 搅拌均匀后，立即倒入组装好的玻璃板中，确保均匀分布。• 用水或异丙醇覆盖凝胶表面，以保持均匀的表面，室温下凝固约 20-30 分钟。二...
(2)SDS-PAGE凝胶配制方法请参照配方表,部分表如下: 表1:SDS-PAGE分离胶配方表 凝胶浓度 各组分名称 各种凝胶体积所对应的各种组分的取样量 5mL 10mL 15mL 20mL 25mL 30mL 40mL 50mL 6% Gel H2O 2.6 5.3 7.9 10.6 13.2 15.9 21.2 26.5 30% Arc-Bis(29:1) 1.0 2.0 3.0 4.0 5.0 6.0 8.0 10.0 1.5M Tris...
以下是制作SDS-PAGE凝胶的基本配方和制胶步骤: 配方: 1. 1%丙烯酰胺(Acrylamide)溶液:将3.7g丙烯酰胺和60μl N,N'-亚甲基双丙烯酰胺溶解在0.5ml双蒸水中,搅拌均匀。 2. 2.5%BT(Bis-Tris)溶液:将0.1g BT和0.25ml TBE(三酸乙酸盐电泳缓冲液)混合均匀。 3. 10%过硫酸铵(AMS)溶液:将10μl AMS溶解在1...
在实验室中,SDS-PAGE(十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳)是一种常用的蛋白质分离技术。今天,我们将深入探讨SDS-PAGE预混胶的配方,以及如何使用不同的染色方法。📖 预混胶配方指南 分离胶的百分比(如6%、10%等)是根据丙烯酰胺含量来确定的。其他成分包括Tri浓度为0.375M,SDS浓度为0.1%,TEMED和APS作为促凝剂,含量...
SDS非连续电泳缓冲液配方 配好胶,电泳成功了一半 前置知识:SDS-PAGE电泳的凝胶主要分为浓缩胶和分离胶。浓缩胶:又称堆积胶,特点是凝胶浓度小、凝胶孔径较大。样品在浓缩胶上,会因为大孔径的凝胶迁移作用而被浓缩至同一条狭窄的区带上。从而使得样品在分离胶中能够高分辨率地分离。分离胶:又称电泳胶,可分为均一...
一、SDS-PAGE凝胶电泳原理 SDS-PAGE凝胶电泳是将蛋白样品加入样品处理液(SDS和巯基乙醇)中,并进行高温加热处理,使蛋白变性,多肽链内部和肽链之间的二硫键打开,使肽链呈现开放状态。打开的肽链通过疏水作用与SDS结合,带有负电荷,在电场的作用下向正极迁移。由于不同大小的肽链在迁移过程中受到的阻力不同,它们逐渐分离...
SDSPAGE凝胶配方及制胶SDS-PAGE凝胶配方及制胶 12%分离胶 体积 试剂 5ml 8ml 10ml 15ml 25ml 30ml 60ml 90ml 120ml 30%Acr-Bis(ml) 2 3.2 4 6 10 12 24 36 48 1.5M Tris-HCl PH8.8(ml) 1.25 2 2.5 3.75 6.25 7.5 15 22.5 30 ddH2O(ml) 1.65 2.64 3.3 4.95 8.25 9.9 19.8 29.7 39.6 10%...
一、胶溶液配方: 1. 30%(w/v)丙烯酰胺(acrylamide)溶液 - 在称量瓶中称取30g丙烯酰胺,并用蒸馏水调至100ml。搅拌溶解直至均匀。 -这是制备聚丙烯酰胺凝胶的基础溶液。 2. 响应稀释液(Response diluent) -用于稀释聚丙烯酰胺溶液以获得不同浓度的凝胶。 -可通过将聚丙烯酰胺溶液与水按1:3体积比混合来制备响应...
1、SDS-PAGE:聚丙烯酰胺凝胶电泳 2、Acr:丙烯酰胺;配胶时用30%Acr(质量比Acr:Bis=29:1) 3、Bis:甲叉双丙烯酰胺 4、DDW:超轻水 5、SDS:十二烷基硫酸/磺酸钠,阴离子去污剂(配胶时用10%) 6、APS:过硫酸铵NH4S2O4配胶时用10% 7、TEMED:四甲基乙二胺,促凝剂 ...