在冬天灌好胶后放在培养箱里,一般情况下很快就凝了,可以提高效率。 (4)经常出现浓缩胶凝但不成形,非常粘,这是因为C液(浓缩胶缓冲液)的pH值不对,重新配制C液 2、如何提高SDS-PAGE电泳的分辨率? 充分聚合聚丙烯酰胺。 建议:有些同学会即配即用或在4度冰箱放置,一方面易导致凝固不充分,另一方面可导致SDS结晶。
1. 检查AP浓度:可能是AP吸收了水分结块,或者发生了氧化。在配制时,尽量避开中间部分,并尝试增加AP的用量。2. 检查TEMED:TEMED可能已经吸收水分或氧化,观察其颜色是否变得很黄。如果是这种情况,需要更换新的TEMED。3. 尝试将胶放入烘箱:将胶体放入烘箱中,温度设置为30℃,这有助于加快凝胶的凝固...
先确定AP、TEMED的量都没问题,应该有各浓度的配方的,加少了或者没加的话就不会凝了.或者你也可以把分离胶配好了,用水封好了以后,把整个架子移到37℃培养箱中,能加快凝胶时间! 结果一 题目 SDS-PAGE胶不凝我配的是12%的胶,但是不凝固,加水封闭的时候能够清晰地分层!这是什么原因造成的啊?AP我是现配的!
活性蛋白整体方案 Active Protein Solutions SDS-PAGE 电泳的常见问题解析(FAQ) 1. 关于凝胶的一些问题 1. 胶的凝结不好,例如有花纹特别是浓度高的胶在冬天温度较低的情况下,在分离胶的下部有波浪样的花纹, 凝胶不均匀.解决方法:加大 TEMED 和过硫酸胺的量,使其凝结速度加快.同时洗干净玻璃板,防止有残 留的...
做SDS-PAGE蛋白电泳配胶 12%的分离胶30分钟左右能凝固但配5%的浓缩胶分离胶时却不能凝固TEMED 加倍不凝固但AP加倍 可以凝 扫码下载作业帮搜索答疑一搜即得 答案解析 查看更多优质解析 解答一 举报 1,多加过硫酸铵试试2,多加点TEMED,可加速凝固3,配好胶后放在温箱里凝的快些,环境温度低会影响凝的速度.我在...
SDS-PAGE电泳中比较常见的问题及解答~1. 蛋白胶凝固不好,很长时间才凝固?答:加大TEMED及过硫酸铵的用量,使胶的凝固速度加快。确保玻璃板洗干净,防止玻璃板上有干胶或残留物附着。2. 蛋白胶不凝固?答:加大TEMED及过硫酸铵的用量;胶凝固时放置于37℃或强光处;使用新鲜配制的过硫酸铵,过硫酸铵容易放置时间过...
1、问:SDS-PAGE胶不凝? 答:1)、先确定AP、TEMED的量都没问题,应该有各浓度的配方的,加少了或者没加的话就不会凝了; 2)、温度和湿度太大,也会影响胶的凝固。分离胶灌入并水封好以后,把整个架子移到37℃培养箱中,能加快凝胶时间! 2、问:SDS-PAGE电泳的分离胶凹凸不平怎么回事?
应该是pH有问题。如果pH不合适,即使加再多TEMED和过硫酸铵都不管用,即使凝了,跑胶也不顺利。
如果试剂没用错,检查APS和TEMED是否过期,APS保质期只有几天,APS和REMED加入的量的不够,凝胶过程很慢;气温太低,凝固也很慢。