解决方案:调整电泳缓冲液的pH值,确保凝胶制备均匀,避免边缘效应。⚡ 电泳过程中电流不稳定 可能原因:电泳槽连接不良,凝胶中存在气泡。 解决方案:检查电泳槽连接是否良好,排除凝胶中的气泡。💧 电泳过程中出现样品溢出 可能原因:样品加入量过多,凝胶孔径不合适。 解决方案:减少样品加入量,选择适当的凝胶孔径。在实验...
电泳电压不合适:电压过高或过低均会影响条带分辨率。 解决办法: 调整凝胶浓度:根据目标蛋白的分子量选择合适的凝胶浓度。 使用新鲜电泳缓冲液:确保缓冲液新鲜,避免使用长时间未更换的电泳缓冲液。 控制电压:电泳过程中应逐步调整电压,避免过高或过低,通常使用堆积胶时采用低电压(80V),进入分离胶后提高至120V左右。 8...
②出现“皱眉”形带(两边向下中间鼓起) 主要出现在蛋白质垂直电泳槽中,一般是两板之间的底部间隙气泡未排除干净 可在两板间加入适量缓冲液,以排除气泡 ③带出现拖尾 样品融解效果不佳或分离胶浓度过大引起 加样前离心;选择适当的样品缓冲液,加适量样品促溶剂;电泳缓冲液时间过长,重新配制;降低凝胶浓度 ④带出现纹...
SDS-PAGE电泳技术流程技术原理SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳，是在聚丙烯酰胺凝胶系统中引进SDS（十二烷基硫酸钠）， SDS会与变性的多肽，并使蛋白带负电荷，由于多肽结合SDS的量几乎总是与多肽的分子量成正比而与其序列无关，因此SDS多肽复合物在丙稀酰胺凝胶电泳中的迁移率只与多肽的大小有关，在达到饱和的状态下，每克多...
凝胶凝结问题 在SDS-PAGE电泳中，凝胶的凝结是一个至关重要的步骤。通常，凝胶的凝固时间应控制在30分钟至1小时以内。若发现凝胶凝结速度过慢或根本无法凝固，这可能与引发聚合反应的试剂——TEMED和APS的状态有关。这两种试剂的用量不足或失效，都会导致凝胶凝固缓慢或失败。值得注意的是，APS（过硫酸铵）由于其不...
在SDS-PAGE电泳过程中，有时我们会遇到条带拖尾和弥散的问题。这可能是由于样品处理不当或电泳条件不合适导致的。为了解决这些问题，我们需要仔细检查样品的处理过程，确保其符合要求，并调整电泳条件，如电压、电流和时间等，以获得更好的电泳效果。可能的原因：样品降解：蛋白质在制备过程中受到损伤，导致其分子量降低...
SDS-PAGE电泳的常见问题解析(FAQ) 活性蛋白整体方案SDS-PAGE电泳的常见问题解析(FAQ) 1.关于凝胶的一些问题 1.胶的凝结不好,例如有花纹特别是浓度高的胶在冬天温度较低的情况下,在分离胶的下部有波浪样的花纹,凝 胶不均匀。解决方法:加大TEMED和过硫酸胺的量,使其凝结速度加快。同时洗干净玻璃板,防止有残留的...
Q:SDS-PAGE电泳的基本原理? A:SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳,是在聚丙烯酰胺凝胶系统中引进SDS(十二烷基硫酸钠),SDS会与变性的多肽,并使蛋白带负电荷,由于多肽结合SDS的量几乎总是与多肽的分子量成正比而与其序列无关,因此SDS多肽复合物在丙稀酰胺凝胶电泳中的迁移率只与多肽...
蛋白样品,SDS-PAGE loading buffer,PBS,Tris-Hcl (PH 8.8), Tris-Hcl (PH 6.8) ,30%丙烯酰胺,10%SDS,10%过硫酸,5×SDS-PAGE电泳缓冲液,考马斯亮蓝R-250染色液,脱色液。 实验步骤 一、凝胶配置 1.分离胶的配制 (1)找出配套的胶板,用擦镜纸擦干净,并固定在配胶器上。随后用去离子水试漏; ...
1、SDS PAGE 电泳 常见问题分析1. 配胶缓冲液系统对电泳的影响?在SDS- PAG环连续电泳中,制胶缓冲液使用的是 Tris - HCL缓冲系统,浓缩 胶是pH6.7,分离胶pH8.9;而电泳缓冲液使用的Tris 甘氨酸缓冲系统。在 浓缩胶中,其pH环境呈弱酸性,因此甘氨酸解离很少,其在电场的作用下,泳 动效率低;而CL离子却很高,两者...