可能原因:电泳缓冲液pH值不合适,凝胶边缘效应。 解决方案:调整电泳缓冲液的pH值,确保凝胶制备均匀,避免边缘效应。⚡ 电泳过程中电流不稳定 可能原因:电泳槽连接不良,凝胶中存在气泡。 解决方案:检查电泳槽连接是否良好,排除凝胶中的气泡。💧 电泳过程中出现样品溢出 可能原因:样品加入量过多,凝胶孔径不合适。 解决...
凝胶浓度不合适:凝胶浓度与蛋白质的分子量不匹配。 电泳缓冲液不新鲜:电泳缓冲液多次使用或变质,导致电场不稳定。 电泳电压不合适:电压过高或过低均会影响条带分辨率。 解决办法: 调整凝胶浓度:根据目标蛋白的分子量选择合适的凝胶浓度。 使用新鲜电泳缓冲液:确保缓冲液新鲜,避免使用长时间未更换的电泳缓冲液。 控制电...
适当减少上样量 ⑧电泳电压很高而电流却很低 这种现象一般初学者易出现。比如电压50v以上,可电流却在5mA以下。主要是由于电泳槽没有正确装配,电流未形成通路。包括:a.内外槽装反;b.外槽液过少;c.电泳槽底部的绝缘体未去掉(比如倒胶用的橡胶皮) 电泳槽正确装配即可 互联网 喜欢作者 我要约稿 上一篇 | 下...
主要原因:电泳槽没有正确装配,电流未形成通路。包括:内外槽装反;外槽液过少等。 处理办法:正确装配电泳槽即可。 活性蛋白整体方案17.如何提高SDS-PAGE电泳分辨率 使聚丙烯酰胺的充分聚合,可以提高凝胶的分辨率。 建议做法:待凝胶在室温凝固后,可在室温下放置一段时间使用。忌即配即用或冰箱放置,前者易导致凝固不充...
凝胶凝结问题 在SDS-PAGE电泳中，凝胶的凝结是一个至关重要的步骤。通常，凝胶的凝固时间应控制在30分钟至1小时以内。若发现凝胶凝结速度过慢或根本无法凝固，这可能与引发聚合反应的试剂——TEMED和APS的状态有关。这两种试剂的用量不足或失效，都会导致凝胶凝固缓慢或失败。值得注意的是，APS（过硫酸铵）由于其不...
Q：提高SDS-PAGE电泳分辨率的途径?A：1、聚丙烯酰胺的充分聚合，可提高凝胶的分辨率。建议做法：待凝胶在室温凝固后，可在室温下放置一段时间使用。忌即配即用或4度冰箱放置，前者易导致凝固不充分，后者可导致SDS结晶。一般凝胶可在室温下保存4天，SDS可水解聚丙烯酰胺。2、一般常用的有氨基黑、考马斯亮蓝、银染色...
SDS PAGE 电泳 常见问题分析 1. 配胶缓冲液系统对电泳的影响 在 SDS PAGE 不连续电泳中 制胶缓冲液使用的是 Tris HCL 缓冲系统 浓缩胶是 pH6.7 分离胶 pH8.9 而电泳缓冲液使用的 Tris 甘氨酸缓冲系统。在浓缩胶中 其 pH 环境呈弱酸性 因此甘氨酸解离很少 其在电场的作用下 泳动效率低 而 CL 离子却很高 ...
SDS-PAGE电泳常见问题sds聚丙烯酰胺凝胶电泳是在聚丙烯酰胺凝胶系统中引进sds十二烷基硫酸钠sds会与变性的多肽并使蛋白带负电荷由于多肽结合sds的量几乎总是与多肽的分子量成正比而与其序列无关因此sds多肽复合物在丙稀酰胺凝胶电泳中的迁移率只与多肽的大小有关在达到饱和的状态下每克多肽可与14g去污剂结合 SDS-PAGE...
凝胶凝结问题 在SDS-PAGE电泳中，我们常常会遇到凝胶凝结速度过慢或无法凝固的情况。这通常与引发聚合反应的试剂——TEMED和APS的状态有关。如果这两种试剂的用量不足或已失效，那么凝胶的凝固过程就会受到影响。值得注意的是，APS（过硫酸铵）由于其不稳定性，容易在长时间暴露于空气中后分解失效，因此每次使用时都...