1、 SDS与蛋白质的结合按质量成比例(即:1.4gSDS/g蛋白质),如果比例不当,就不能得到准确的数据。 2、 用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法测定蛋白质相对分子量时,必须同时作标准曲线。不能利用这次的标准曲线作为下次用。 3、 有些蛋白质由亚基(如血红蛋白)或两条以上肽链(α-胰凝乳蛋白酶)组成的,它们在巯基乙醇和...
本实验通过利用SDS-PAGE测定实验四纯化的麦清蛋白,学习和掌握SDS-PAGE测定蛋白质分子量的原理,掌握其具体操作;并与活性电泳进行对比,了解其异同,加深对电泳技术了理解。 二、实验原理 1、聚丙烯酰胺凝胶电泳可对蛋白质的种类和数量做定性分析,带电蛋白质分子在电场作用下将作定向移动,在其他条件( 电场、介质粘度等)...
SDS-PAGE测定蛋白质相对分子质量一、前言聚丙烯酰胺凝胶电泳聚丙烯酰胺凝胶电泳,简称PAGE,是以聚丙烯酰胺凝胶作为支持介质的一种常用电泳技术。聚丙烯酰胺凝胶由单体丙烯酰胺和甲叉双丙烯酰胺聚合而成,聚合过程由自由基催化完成。催化聚合的常用方法有两种:化学聚合法和光聚合法。化学聚合以过硫酸铵(APS)为催化剂,以四...
SDSPAGE测定蛋白质相对分子质量实验报告 实验报告:SDS测定蛋白质相对分子质量 一、实验目的: 通过SDS-技术测定蛋白质的相对分子质量。 二、实验原理: SDS-是一种常用的蛋白质电泳分离技术。在该技术中,蛋白质样品与SDS(十二烷基硫酸钠)和还原剂混合后,加热可以使蛋白质完全还原并且与SDS结合,形成具有负电荷的复合...
一、实验目的 掌握蛋白类药物SDS-PAGE法检测分子量和纯度的原理和方法。二、实验原理 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(简称SDS-PAGE)，也叫变性聚丙烯酰胺凝胶电泳，是以聚丙烯酰胺凝胶作为支持介质的一种含有蛋白变性剂SDS（十二烷基硫酸钠）的常用电泳技术，常用于检测蛋白质。聚丙烯酰胺凝胶是由一定量的丙烯酰胺和甲叉双丙烯...
SDS-PAGE 测定蛋白质相对分子质量 一、前言 聚丙烯酰胺凝胶电泳 聚丙烯酰胺凝胶电泳,简称 PAGE,是以聚丙烯酰胺凝胶作为支 持介质的一种常用电泳技术。聚丙烯酰胺凝胶由单体丙烯酰胺和甲叉 双丙烯酰胺聚合而成,聚合过程由自由基催化完成。催化聚合的常用 方法有两种:化学聚合法和光聚合法。化学聚合以过硫酸铵(APS)为催...
SDS-PAGE实验报告 一、实验目的: 1.1理解SDS-PAGE测定蛋白质相对分子质量的基本原理。 1.2掌握分子电泳的基本步骤,掌握计算蛋白质相对分子质量的方法。 二、实验内容和原理: 2.1电泳(electrophoresis):是指带电颗粒在电场中向着与它电性相反的电极移动的现象。许多重要的生物分子都含有可电离基团(如氨基酸、多肽、蛋白...
SDS-PAGE可以十分方便地用于未知蛋白质分子量的测定,不同分子量的蛋白质在电泳图谱中有不同的迁移距离,依据该特性,SDS-PAGE具有用于物质鉴别的潜能。在实验过程中,我们仍发现一些操作上的问题可能影响实验结果。首先,在测定样品蛋白质分子量时,脱色后的凝胶出现破碎,可能与摇床的振摇速度过快有关,应控制摇床的速度,...
sds-page一、实验目的: 1.1理解SDS-PAGE测定蛋白质相对分子质量的基本原理。 1.2掌握分子电泳的基本步骤,掌握计算蛋白质相对分子质量的方法。 二、实验内容和原理: 2.1电泳(electrophoresis):是指带电颗粒在电场中向着与它电性相反的电极移动的现象。许多重要的生物分子都含有可电离基团(如氨基酸、多肽、蛋白质、核苷...
八、试验留意事项不是全部的蛋白质都能用SDS-凝胶电泳法测定其分子量,已觉察有些蛋白质用这种方法测出的分子量是不行靠的。包括:电荷特别或构象特别的蛋白质,带有较大辅基的蛋白质(如某些糖蛋白)以及一些构造蛋白如胶原蛋白等。例如组蛋白F1电荷,因此,尽管结合了正常比例的SDS21,000SDS-35,000相互验证。SDS和...