有一点我用别人的分离胶缓冲液的时候分离胶跑1小时就到头了用我自己配的要跑1个半小时不知道和条带颜色浅有没有关系条带形状是正常的结果一 题目 SDS-PAGE跑了4、5回了,条带颜色总是特别浅看不清楚,连MARKER都看不清楚,是怎么回事啊?连着练了好几天了,每次都不出结果,用相同的样品在别人制的胶上面跑出来...
1 上样量太少,或者电泳时候loading buffer不行,导致蛋白跑了 2 脱色时间不够,建议K-G染色后,脱色液在30min内换两次 3 重新按标准配置电泳缓冲液。
用相同的样品在别人制的胶上面跑出来就看的清楚,不知道制胶的时候什么最影响条带深浅啊这两天又跑了好几次,没有一次成功,都是条带颜色浅。重新配制了分离胶缓冲液和浓缩胶缓冲液,APS也是新配的。样品是昨天新制的,跑出来还是颜色浅,MARKER分别用了两种,颜色都很浅。
主页> 问答中心> 蛋白分析FAQ汇总> 蛋白印迹实验中,跑完SDS-PAGE后条带很浅,有些甚至没有条带是什么原因? 如果电泳过程没有问题的话,可以考虑样品中是否含有目标蛋白,或者是不是上样量太少。 相关服务: 蛋白质免疫印迹和电转移服务 提交需求 姓名*
也有可能是蛋白质提取出了问题,可以看一下marker的条带是不是也是深浅不一的。或者是曝光液的问题,...
100℃煮沸5min,然后跑sds-page几乎没有条带,只有两三条很浅的带,和师兄同一块胶跑的,其他的...
第二部分:条带过浅 这个问题可能是由于加样孔成形不佳和/或凝胶加样不认真所致。背景较深而且不均一说明蛋白可能存在于电泳缓冲液中。最有可能原因是由于装置没有正确紧密的装配导致较多的样品溢出加样孔。溢出的样品很可能不会重新溶入形成条带,因为这些蛋白从上层缓冲液的间隔持续进入凝胶。
在SDS-PAGE中有时会遇到各种各样的问题,不妨来看看该如何解决吧。问题一:微弱或缺失的蛋白条带可能的原因1:加样量低于染色剂的检测水平,样品分子量太小——小肽(小于4kda)解决方法:检查A280并增加样品浓度使用更敏感的染色剂(例如银染)可能的原因2:蛋白质没有固定在凝...
1.一般来说,加样孔还是足够深的应该有(1cm),如果觉得比较浅可以多加一点浓缩胶,用来压制胶水平的水或乙醇一点点就可以了。2.如果只是两边的孔走样,中间的没问题的话,两边的孔加样后条带不直,很可能是电泳槽下面的气泡没有排尽,或者根本就没有注意下面有气泡,另外在电泳过程中因为会产生热...
SDS-PAGE电泳条带跑偏了,相邻蛋白条带跑在一起了,什么原因造成的? 1.5万 1 0:56 App 为什么SDS-PAGE电泳前要煮蛋白呢? 3835 1 4:15 App Western Blot实验指南(001-SDS-PAGE) 2838 -- 1:11 App SDS-PAGE电泳分辨率不高,有什么办法可以优化? 5174 1 0:51 App SDS-PAGE电泳凝胶的浓度大小对蛋白迁移...