十二烷基硫酸钠—聚丙烯酰胺凝胶电泳(Sodium dodecyl sulfate-Polyacrylamide gel electrophoresis,SDS-PAGE)是一种能够分离和测定蛋白质组成的电泳方法,主要用于测定蛋白质亚基分子质量。带电粒子在电场中向带有相反电荷的电极移动,叫做电泳。若以V代表球形分子在电场中的移动速度,E代表电场强度,q为带电粒子所带电荷量...
SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳是最常用的定性分析蛋白质的电泳方法,特别是用于蛋白质纯度检测和测定蛋白质分子量。 SDS-PAGE -巯基乙醇的样品处理液,SDS即十二烷基磺酸钠(CH3-(CH2)10-CH2OSO3-是在要走电泳的样品中加入含有SDS和 -巯基乙醇可以断开半胱氨酸残基之间的二硫键,破坏蛋白质的四级结构。电泳样品加入样品处理...
SDS-PAGE,聚丙烯酰胺凝胶电泳详解 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳 SDS-Polyacrylamidegelelectrophoresis,SDS-PAGE 1 一、什么是SDS?十二烷基硫酸钠(sodiumdodecylsulfate,SDS)是一种阴离子去污剂。它在水溶液中以单体(monomer)和分子团(micellae)的混合形式存在。2 SDS的作用 破坏蛋白质分子之间以及其他物质分子之间的非...
在PAGE凝胶中引入SDS(十二烷基磺酸钠,含有大量带负电荷的SO32-),SDS能破坏蛋白质分子的二级、三级结构,在含有强还原剂的溶液中可与蛋白质形成SDS-蛋白质复合物。由于结合大量带负电荷的SDS,好比蛋白质穿上带负电的“外衣”,蛋白质本身带有的电荷则被掩盖了,从而起到消除各蛋白质分子之间自由的电荷差异的作用,蛋白...
SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳 SDS-Polyacrylamidegelelectrophoresis,SDS-PAGE 精品课件 一、什么是SDS?十二烷基硫酸钠(sodiumdodecylsulfate,SDS)是一种阴离子去污剂。它在水溶液中以单体(monomer)和分子团(micellae)的混合形式存在。精品课件 SDS的作用 破坏蛋白质分子之间以及其他物质分子之间的非共价键,使蛋白质变性...
SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳 SDS-Polyacrylamidegelelectrophoresis,SDS-PAGE 一、什么是SDS?十二烷基硫酸钠(sodiumdodecylsulfate,SDS)是一种阴离子去污剂。它在水溶液中以单体(monomer)和分子团(micellae)的混合形式存在。SDS的作用 破坏蛋白质分子之间以及其他物质分子之间的非共价键,使蛋白质变性而改变原有的构象,...
SDS-PAGE,聚丙烯酰胺凝胶电泳详解 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳 SDS-Polyacrylamidegelelectrophoresis,SDS-PAGE 1 一、什么是SDS?十二烷基硫酸钠(sodiumdodecylsulfate,SDS)是一种阴离子去污剂。它在水溶液中以单体(monomer)和分子团(micellae)的混合形式存在。2 SDS的作用 破坏蛋白质分子之间以及其他物质分子之间的非...
PAGE有非变性聚丙烯酰氨凝胶电泳(Native-PAGE)和变性聚丙烯酰氨凝胶电泳(蛋白质变性剂通常为SDS,核酸变性剂通常为尿素、甲酰胺等)。Native-PAGE过程中蛋白质能保持完整状态,并依据分子量大小、形状及其所附带的电荷量而逐渐呈梯度分开。而SDS-PAGE仅根据蛋白质亚基分子量的不同就可以分开蛋白质。其中SDS(十二烷基...
采用十二烷基硫酸钠-聚丙稀酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE,polyacrylamidegelelectrophoresis)方法可对蛋白质的组分进行分离,并可精确测得蛋白质的分子量。常用的方法为SDS-PAGE不连续系统。基本原理:聚丙稀酰胺是由丙稀酰胺(acrylamide)和N,N’-亚甲基双丙稀酰胺(N,N’-methylenebisacrylamide)经共聚合而成。此聚合过程是...
蛋白样品,SDS-PAGE loading buffer,PBS,Tris-Hcl (PH 8.8), Tris-Hcl (PH 6.8) ,30%丙烯酰胺,10%SDS,10%过硫酸,5×SDS-PAGE电泳缓冲液,考马斯亮蓝R-250染色液,脱色液。 实验步骤 一、凝胶配置 1.分离胶的配制 (1)找出配套的胶板,用擦镜纸擦干净,并固定在配胶器上。随后用去离子水试漏; ...