SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳是最常用的定性分析蛋白质的电泳方法,特别是用于蛋白质纯度检测和测定蛋白质分子量。 SDS-PAGE -巯基乙醇的样品处理液,SDS即十二烷基磺酸钠(CH3-(CH2)10-CH2OSO3-是在要走电泳的样品中加入含有SDS和 -巯基乙醇可以断开半胱氨酸残基之间的二硫键,破坏蛋白质的四级结构。电泳样品加入样品处理...
用聚丙烯酰胺凝胶电泳法分离鉴定蛋白质(protein),主要依赖于电荷效应和分子筛效应,再与标准样品对照即可确定各区带的成分。要利用凝胶电泳测定某样品的蛋白质相对分子质量,就必须去掉其电荷效应,使样品的蛋白质分子的迁移率完全取决于相对分子质量。如在电泳体系中加入一定浓度的十二烷基硫酸钠(sodium dodecyl sulfa...
SDS-PAGE即十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳,是一种常用的分离和检测蛋白质的技术。02 它利用了SDS(十二烷基硫酸钠)与蛋白质结合的性质,使蛋 白质带负电荷,从而在电场中向正极移动。聚丙烯酰胺凝胶作为支持介质,能够根据蛋白质分子量的不同 03 对其进行分离。蛋白质的分子量测定 通过比较标准蛋白的迁移率和...
如:蛋白质盐析沉淀提取→葡聚糖凝胶层析分离→DEAE-纤维素分离提纯蛋白质→蛋白质纯度鉴定、蛋白质分子量测定等。精选2021版课件 3 一、实验目的 通过该实验使学生掌握SDS-PAGE测定蛋白质分子量的原理;掌握该技术的操作方法(基础性很强,使用范围宽阔;运用SDS-PAGE测定蛋白质分子量及染色鉴定。精选2021版课件 4 ...
用聚丙烯酰胺凝胶电泳法分离鉴定蛋白质(protein),主要依赖于电荷效应和分子筛效应,再与标准样品对照即可确定各区带的成分。 要利用凝胶电泳测定某样品的蛋白质相对分子质量,就必须去掉其电荷效应,使样品的蛋白质分子的迁移率完全取决于相对分子质量。如在电泳体系中加入一定浓度的十二烷基硫酸钠(sodium dodecyl sulfate,...
解聚后的氨基酸侧链与SDS充分结合形成带负电荷的蛋白质-SDS胶束,所带的负电荷大大超过了蛋白质分子原有的电荷量,这就消除了不同分子之间原有的电荷差异。蛋白质-SDS胶束在水溶液中的形状像一个长椭圆棒,椭圆棒的短轴对不同的蛋白质-SDS胶束基本上是相同的。但长轴的长度与亚基分子质量的大小成正比。因此这种胶束...
(7)标准蛋白质的相对迁移率最好在0.2~0.8之间均匀分布。值得指出的是,每次测定未知物分子量时,都应同时用标准蛋白制备标准曲线,而不是利用过去的标准曲线。用此法测定的分子量只是它们的亚基或单条肽链的分子量,而不是完整的分子量。为测得精确的分子量范围,最好用其他测定蛋白分子量的方法加以校正。此法对球...
应用垂直型、SDS不连续系统凝胶电泳法、测定蛋白质的分子量。 二、实验原理 SDS是十二烷基硫酸钠(Sodium Dodecyl Sulfate)简称,它是一种很强的阴离子表面活性剂,SDS以其疏水基和蛋白质分子的疏水区相结合,形成牢固的带负电荷的SDS-蛋白质...
要利用凝胶电泳测定某样品的蛋白质分子量就必须去掉其电荷效应,因此,当电泳时,蛋白质分子的迁移率取决于其分子大小。SDS能破坏蛋白质分子间以及其他物质分子间的非共价键使蛋白质的构象发生变化,继而使蛋白质变性解离成单一亚基,从而降低或消除了各种蛋白质分子间的天然电荷差异,形成SDS-蛋白质负离子,因此,当电泳时,...
用聚丙烯酰胺凝胶电泳法分离鉴定蛋白质(protein),主要依赖于电荷效应和分子筛效应。再与标准样品对照即可确定各区带的成分。要利用凝胶电泳测定某样品的蛋白质分子量就必须去掉其电荷效应,使样品的蛋白质分子的迁移率完全取决于分子量。 如在电泳体系中加入一定浓度的十二烷基硫酸钠(Sodiumdodecylsulfate简称SDS)。这种阴...