SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳技术 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳技术 首先在1967年由Shapiro建立,1969年由Weber和Osborn进一步完善。一、原理 聚丙烯酰胺凝胶是由丙烯酰胺 (简称Acr) 和交联剂N,N’—亚甲基双丙烯酰胺(简称Bis)在催化剂过硫酸铵(AP),N,N,N’,N’-四甲基乙二胺(TEMED)作用下,聚合交联而成的具有网状...
蛋白质的纯度鉴定可通过SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳法。利用SDS-PAGE电泳方法或毛细管电泳法(CE-SDS)提供了最简单、成本最低,并且在确定样品中蛋白质组分数目方面灵敏度最高的手段,因此最为常用。 SDS 凝胶电泳以及利用电泳测定分子质量和大小的方法 。这个方法都可以单独测定样品的纯度,方法的选择取决于希望检测待测蛋...
携带有pGLO的大肠杆菌在含有相应诱导物和素的条件下培养,可以表达GFP,这比不加诱导物的同样的大肠杆菌在SDS—PAGE凝胶上要多出一条明显的条带。表达的蛋白也可用非变性的聚丙烯酰胺凝胶电泳检测,紫光灯下可以看到诱导后的样品在凝胶上有绿色荧光条带出现。还可以通过**印迹染色(Western—blotting)的方法,用GFP的抗体检...
【解析】 (1)基本原理:SDS(十二烷基硫酸钠)是一种阴离子去污剂,带有很多负电荷,如果在聚丙烯酰胺凝胶 电泳中加入一定量的SDS(一般加入量为0.1%),在SDS存在下,蛋白质变性,肽链伸展,SDS与蛋白 质结合以后,蛋白质分子带有足够的负电荷,远远超过了蛋白质分子原有的电荷,所以蛋白质分子在 电场中的迁移速度主要取决...
聚丙烯酰胺凝胶电泳技术-SDS-PAGE SDS-PAGE原理 一、基本原理概述二、SDS的性质与作用三、PAGE胶的性质四、缓冲液系统五、基本步骤 一、SDS-PAGE技术基本原理概述 SDS:消除了蛋白质分子间的形状差异;掩盖了肽链本身所带电荷(SDS带负电)观看视频 电泳时蛋白质按分子量大小分离 PAGE和SDS-PAGE...
百度试题 题目SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳技术最常用的指示剂为:() A. 亚甲基兰\n B. 石蕊\n C. 碘乙醇\n D. 溴酚兰 相关知识点: 试题来源: 解析 D.溴酚兰
解答 解:A、SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳技术中分子的迁移速率主要取决于分子的大小,A正确;B、检验醋酸可用品尝或用pH试纸鉴定,B正确;C、DNA在0.14mol/LNaCl溶液中溶解度最小,故可使DNA析出从而去除杂质,C正确;D、亚硝酸盐有毒性,测定亚硝酸盐的含量不能可用品尝法,D错误.故选:ABC. 点评 本题考查了蛋白质的提取...
电泳是分离蛋白质和核酸、嘌呤、嘧啶、一些有机化合物甚至无机离子等物质的主要技术。大多数电泳方法是将样品在一个固定化的介质中进行分离。聚丙烯酰胺凝胶是主要的介质之一。聚丙烯酰胺是一种多孔凝胶,孔径接近蛋白质分子的大小,从而提高了蛋白质的分辨率。此外,聚丙烯酰胺凝胶还具有良好的化学稳定性、强重复性、对pH和...
【解析】①SDS一聚丙烯酰胺凝胶电泳法中加入SDS的作用是掩盖不同种蛋白质间的电荷差别,使SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳的迁移速率完全取决于分子大小,①正确②DNA的合成方向总是从子链的5'端向3'端延伸这与引物的结构和长度无关, ② 错误;③ 在多聚酶链式反应中,TaqDNA聚合酶只复制引物之后的DNA序列,即只能复制DNA的...