RT-PCR 方法用于 ALK 基因检测争议很大,虽然国内 NMPA(中国药品监督管理局)已经批准了 RT-PCR 方法用于 ALK 基因检测,但该方法未被美国 FDA 和欧洲 EMA 批准,NCCN 指南对 RT-PCR 用于 ALK 检测也不十分认可(Targeted real-time PCR assays are used in some settings, although it is unlikely to detect fus...
1.4 RT-PCR 反应严格按照 RevertAid™ First Strand cDNA Synthesis Kit Synthesis K it操作说明进行逆转录，反应体系为 20 j j l I,上样量在300~ 1000 n g,逆转录P C R反应条件:42 t e O m in J O t 5 1^!1，4<€保存。将逆转录好的反应液取3 41 严格按照 SYBR Green Realtime PCR ...
研究发现,大部分白血病患者细胞中存在异常的融合基因UBA2-WTIP,可作为检测白血病的特异性分子标志物。科研人员通过RT-PCR方法克隆得到融合基因UBA2-WTIP,为了研究该基因的作用和致病机制,需要构建重组载体并把目的基因和FLAG标签基因序列连接起来,分别获得带有FLAG肽链的UBA2-WTIP融合蛋白和WTIP蛋白。FLAG肽链由8个氨基酸残...
摘要 目的探讨同时检测白血病29种染色体结构畸变形成的融合基因与MIC分型的关系。 方法采用多重巢式RT-PCR方法对191例儿童白血病29种染色体结构畸变形成的融合基因进行分 析。结果191例白血病患者骨髓或外周血标本中,86例(45.0%)具有14种染色体结构畸变产生的融 ...
因为最终表达反应都是通过合成氨基酸来表达的，因为dna含有大量的没有表达的信息，所以直接提取rna，通过反转录成CDNA，然后在检测融合基因是否融合
目的:建立多重逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)联合毛细管电泳法检测BCR-ABL融 合基因,以期应用于慢性粒细胞白血病(CML)辅助诊断.方法采用重叠延伸法构建BCR-ABL融合基因阳性模板,设计并优化检测BCR-ABL融合基因 的多重RT-PCR联合毛细管电泳体系,对检测体系进行初步的性能评估.结果多重RT-PCR技术检测BCR-ABL融合基因(e1...
产品名称:白血病相关15种融合基因检测试剂盒 (荧光RT-PCR法) 企业名称:苏州云泰生物医药科技有限公司 临床试验描述:申请人在苏州大学附属第一医院、浙江大学医学院附属第一医院、上海交通大学医学院附属上海儿童医学中心和首都医科大学附属北京儿童医院共四家临床试验机构完成了临床试验。采用试验体外诊断试剂与染色体核型分...
定量检测4例急性 早幼粒细胞白血病(APL)患者治疗前后骨髓内PML-RARa融合基因转录本水平,并对1例经治疗完全缓解后又复发的患者PML-RARa转录本水平 (拷贝数)进行动态监测.结果表明:用本研究建立的实时定量RT-PCR方法可检测出10-5μg NB4细胞cDNA中的PML-RARa融合基因,其重复性的CT值,管间,批间变异系数(CV)分别...
并采用此方法对 bcrabl 融合基因进行定量分析.方法:通过 RT-PCR 扩增 K562 细胞 bcr-abl 融合基因, 用 T-A 克隆法构建重组质粒作为标准品.绘制出 bcr-abl 的标准曲线,并对 16 例慢 性粒细胞白血病患者骨髓标本进行 bcr-abl 融合基因进行定量.标定 RT-PCR 反应 的敏感性、稳定性和重复性.结果:检测到 10 ...
摘要 本发明提供了一种血液病融合基因筛查方法,包括以下步骤:提取人体血液RNA样本,得到RNA模板;将RNA模板进行反转录,得到cDNA;将cDNA分组进行巢式PCR扩增;将扩增产物进行琼脂糖凝胶电泳,得到阳性分组;将阳性组的单管进行分离PCR扩增;将阳性组的扩增产物进行琼脂糖凝胶电泳,确定融合基因类型。本发明采用多重巢...