【题目】目前采用RT-PCR技术(逆转录荧光PC R技术)进行新冠毒核酸检测,操作流程:从密接者组织中提取RNA→将RNA逆转录为cDNA→PCR扩增cDNA→DNA分子杂交进行核酸检测→通过荧光强度判断是否含有病毒核酸。“核酸检测试剂盒实际上是盛放有几种关键试剂的盒子,比如:特异性的荧光DNA探针(特异性的带荧光的病毒核酸序列)逆...
新冠病毒是一种单链RNA病毒,常用“荧光RT-PCR技术”进行检测,方法是取检测者的mRNA在试剂盒中逆转录出cDNA,并大量扩增,同时利用盒中荧光标记的新冠病毒核酸探针来检测PCR产物中是否含有新冠病毒的cDNA,在检测过程中,随着PCR的进行,反应产物不断累积,“杂交双链”荧光信号的强度也等比例增加。 (1)“荧光RT-PCR技术...
RT-PCR 技术灵敏而且用途广泛,可用于检测细胞中基因表达水平、表达差异,细胞中RNA 病毒的含量和直接克隆特定基因的 cDNA序列(complement DNA)。RT-PCR比其他包括Northern印迹、RNase保护分析、原位杂交及S1核酸酶分析在内的RNA分析技术更灵敏,更易于操作。 逆转录RT-PCR提取组织或细胞中的总RNA,以其中的mRNA作为模板,...
🔍 RT-PCR,顾名思义,是逆转录PCR的简称。它巧妙地将RNA的逆转录(RT)和cDNA的聚合酶链式扩增反应(PCR)结合在一起。这种技术不仅灵敏,而且应用广泛,可以检测细胞/组织中的基因表达水平、细胞中RNA病毒的含量,甚至直接克隆特定基因的cDNA序列。📚 它的工作原理是这样的:首先,从组织或细胞中提取总RNA,然后以其中...
一、本次RT-PCR实验目的 学习和掌握逆转录、RT-PCR基因扩增技术和操作方法,并深刻理解逆转录、RT-PCR基因扩增技术在功能基因克隆与载体构建过程中的重要性。 二、RT-PCR实验试剂和材料 大肠杆菌DH5a、Trizol试剂、逆转录试剂、PCR相关试剂、PCR产物克隆试剂、氯仿、异丙醇、DEPC水等。
常采用RT-PCR技术(逆转录荧光PCR技术)检测多种病毒感染。该技术的原理是:在PCR反应体系中加入引物的同时,加入与某条模板链互补的荧光探针,当DNA聚合酶催化子链延伸至探针处时会水解探针,使荧光监测系统记录到荧光信号,即每个荧光探针被水解就有一个荧光信号生成并被准确记录(如图)。 (1)PCR反应体系中需要添加模板...
新冠病毒是一种单链RNA病毒,用“荧光RT-PCR技术”进行检测,方法是取检测者的mRNA逆转录出cDNA,并大量扩增,用荧光标记的新冠病毒核酸探针来检测PCR产物中是否含有新冠病毒的cDNA.在检测过程中,得到一条荧光强度的变化曲线,如图所示(根据超过阈值时Cyle的次数确定是否是新冠确诊病例)。下列说法错误的是( ) A. “荧光...
RT-PCR是一种基于实验室的技术,用于检测和比较样品中核糖核酸(RNA)和表面蛋白的水平,特别是RNA数量有限的样品。 02 我们如何使用RT-PCR来诊断COVID-19? 2.1、获得一个样品 诊断COVID-19需要从病人身上取样,通常使用鼻咽或口咽拭子,或最近使用唾液样本,并使用RT-...
chain reaction, RT-PCR）是将RNA的反转录和cDNA的聚合酶链式扩增（PCR）相结合的技术。