1【题文】目前采用RT-PCR技术(逆转录荧光PCR技术)进行新冠毒核酸检测,操作流程:从密接者组织中提取RNA→将RNA逆转录为cDNA→PCR扩增cDNA→DNA分子杂交进行核酸检测→通过荧光强度判断是否含有病毒核酸。“核酸检测试剂盒实际上是盛放有几种关键试剂的盒子,比如:特异性的荧光DNA探针(特异性的带荧光的病毒核酸序列)逆转...
新冠病毒是一种单链RNA病毒,常用“荧光RT-PCR技术”进行检测,方法是取检测者的mRNA在试剂盒中逆转录出cDNA,并大量扩增,同时利用盒中荧光标记的新冠病毒核酸探针来检测PCR产物中是否含有新冠病毒的cDNA,在检测过程中,随着PCR的进行,反应产物不断累积,“杂交双链”荧光信号的强度也等比例增加。 (1)“荧光RT-PCR技术...
RT-PCR 技术灵敏而且用途广泛,可用于检测细胞中基因表达水平、表达差异,细胞中RNA 病毒的含量和直接克隆特定基因的 cDNA序列(complement DNA)。RT-PCR比其他包括Northern印迹、RNase保护分析、原位杂交及S1核酸酶分析在内的RNA分析技术更灵敏,更易于操作。 逆转录RT-PCR提取组织或细胞中的总RNA,以其中的mRNA作为模板,...
新型冠状病毒的检测主要包含核酸检测、抗体检测、抗原检测等几种方法。其中利用实时荧光RT-PCR技术检测新型冠状病毒特异性核酸序列是最常用的方法。RT-PCR是将逆转录(R
新冠病毒是一种单链RNA病毒,常用“荧光RT-PCR技术”进行检测,方法是取检测者的mRNA逆转录出cDNA,并大量扩增,时,用荧光标记的新冠病毒核酸探针来检测PCR产物
本试剂盒基于一步法RT-PCR技术,选取新型冠状病毒2019-nCoV ORF1ab和N基因作为扩增靶区域,设计特异性引物及荧光探针用于标本中新型冠状病毒RNA的检测;本试剂盒同时包括内源性内标检测系统,用于对标本采集、核酸提取过程及PCR扩增过程的监控,可减少假阴性结果的出现...
临床上常采用RT-PCR技术,对受测者咽拭子取样后进行新型冠状病毒核酸检测。RT-PCR是指以病毒的RNA为模板合成cDNA,并对cDNA进行PCR扩增的过程。为定量测定样品中病毒的核酸,常采用实时荧光PCR扩增技术,该技术原理如题14图所示。在PCR反应体系中每加入一对引物的同时,加入一个与某条模板链互补的荧光探针,当Tag DNA聚...
chain reaction, RT-PCR）是将RNA的反转录和cDNA的聚合酶链式扩增（PCR）相结合的技术。
通过咽拭子取样进行RT-PCR(逆转录荧光PCR技术)检测是目前临床上诊断新型冠状病毒感染疑似患者的常用方法。图为RT-PCR技术的原理(数字表示步骤):PCR过程中探针和引物一起与模板结合,探针两侧分别带有荧光基团和淬灭基团(抑制荧光发出),当酶催化子链延伸至探针处时会水解探针,导致荧光基团与淬灭基团分离而发出荧光。②③...