百度试题 结果1 题目影响RT-PCR 结果的因素有哪些?相关知识点: 试题来源: 解析 答案:mRNA的质量、反转录酶的质量、引物的质量 反馈 收藏
RT-PCR反应的成效受到多种因素的精密调控，其中包括硫酸镁的浓度、引物的退火温度以及扩增循环数。首先，对于硫酸镁的浓度，推荐在0.5至3.0毫摩尔每升（mM）范围内进行初步实验，每次调整0.5 mM，以寻求最佳反应效果。对于引物的处理，如果引物的Tm（熔解温度）较高，可以适当提高退火和延伸阶段的温度。
常规的RT-PCR体系的配制需要加入引物、模板、反转录酶、RNase Inhibitor、RT Buffer、dNTP、RNase-free H2O等等试剂,操作步骤繁琐复杂。 那么,重点来啦!! AG0304试剂盒为一管式反转录预混 Mix,其中2×SPARKscript Ⅱ RT Plus Master Mix 中含有反转录第一链合成所需的所有试剂(SPARKscript Ⅱ Hˉ RTase、RNase ...
RT-PCR反应受多个因素影响，如硫酸镁的浓度, 引物退火的温度，扩增的循环数等。◇建议选择0.5-3.0 mM (相差0.5 mM)的硫酸镁作初步实验。◇对于具有较高Tm的引物，增加退火和延伸时的温度对反应有利。较高的温度有利于减少非特异的引物结合，因而提高特异产物的得率。◇大多数目标RNA经40轮PCR反...
图1 影响RT-PCR的因素主要可以概括为以下几点: 1) RNA的质量 反转录必须保证实验使用的RNA质量(如图2所示):琼脂糖电泳胶图包括28S和18S两条清晰明亮的条带(真核样品),且28S/18S≈2:1,A260/280≈2.0,泳道无弥散区、无基因组、蛋白污染等。 图2 思科捷货号:AC0307,样本:玉米种子 2)&...阅读全文Troublesh...
病毒及马铃薯S病毒,分别得到562pb,255bp,182bp大小的扩增片段.试验从 反转录反应,PCR反应及循环条件3方面讨论了试剂和循环条件对三重RT-PCR同步检测3种病毒的影响.结果表明反转录反应中dNTPs浓度,3种病毒 下游引物浓度比例对整个反应影响较大;其次是PCR反应中MgCl2浓度和退火温度;反转录时间,循环条件对RT-PCR影响较...
RT-PCR快速诊断禽流感 根据禽流感病毒NP基因的序列分析结果,设计了一对NP基因特异的引物。采用该对引物,不经病毒分离,直接从禽流感病毒感染鸡的气管、泄殖腔棉拭子和组织样品中提取核酸, RT... 刘明,于康震,崔尚金,... - 《中国预防兽医学报》 被引量: 59发表: 2000年 ...
本实验采用川中岛和双久红两个品种,用半定量RT-PCR的方法来进行PG基因的克隆与表达分析。试验结果表明,PG基因对桃果实的质地变化起到至关重要的作用。 The peach fruit quality of material change process is composed by a series of physiological biochemistry change process, these changes receives very many ...
影响RT-PCR的因素主要可以概括为以下几点: 1) RNA的质量 反转录必须保证实验使用的RNA质量(如图2所示):琼脂糖电泳胶图包括28S和18S两条清晰明亮的条带(真核样品),且28S/18S≈2:1,A260/280≈2.0,泳道无弥散区、无基因组、蛋白污染等。 图2 思科捷货号:AC0307,样本:玉米种子 ...