你说的应该是real time PCR吧,注意RT其实是逆转录reverse transcription的缩写,和real time一定要分开来.常说的qPCR,qRT-PCR,都是通过实时(real time)的方法,测定样品中某个模版的起始量ct值但是呢,由于之前RNA提取、反转等步骤,各个步骤存在不同的效率,ct值并无法真实反应样品中模版的绝对量,因此,需要一个内参...
内参就是在cDNA里面的啊 比如你有三种反转录的cDNA 就分别用内参的引物做三组 和目标基因一起做就行了 不过是要单独加 不是和目标基因的引物加在一个孔里
在细菌定量PCR实验中,常用的内参包括:16S rRNA基因:这是一种高度保守的基因,在细菌中广泛存在。在细...
因为GAPDH的基因表达量在是不同状态下是变化很小的,所以可以认为GAPDH表达是恒定的,所以可以选择它来做内参。
请问,GAPDH作为RT-PCR内参的原理是什么呀?我知道为什用它做内参了,就是不清楚怎么用它, 扫码下载作业帮搜索答疑一搜即得 答案解析 查看更多优质解析 解答一 举报 一般认为一些持家基因的表达量在不同状态下变化不大,所以可以认为它们表达是恒定的,故而用来做内参简而言之,就是你有两个样品(譬如不同生长条件或者不...
miRNA做时定量一般用的内参是U6,其它常见的action、18s可不可以用呢?
1. 内参即是内部参照(Internal Control),对于哺乳动物细胞表达来说一般是指持家基因(Housekeeping Genes),它们在各组织和细胞中的表达相对恒定,在检测蛋白的表达水平变化时常用它来做参照物。 2. RT-PCR比较不同条件下或者不同组织中,目的基因表达量的相对多少,前提条件是等量的细胞上样,才有比较的基础。特别表达量...
所有曲线都要在上升期的中间,不光是内参。进入平台期,反应就饱和了,也就是说再反应下去,产量也不增加。CT值就不和原来的样本浓度有关系了。计算可以用免费的 Image J
做RT-PCR内参的作用是什么?应该如何选择管家基因 答案 你说的应该是real time PCR吧,注意RT其实是逆转录reverse transcription的缩写,和real time一定要分开来.常说的qPCR,qRT-PCR,都是通过实时(real time)的方法,测定样品中某个模版的起始量ct值但是呢,由于之前RNA提取、反转等步骤,各个步骤存在不同的效率,ct值...