RT-PCR的指数扩增是一种很灵敏的技术,可以检测很低拷贝数的RNA。RT-PCR广泛应用于遗传病的诊断,并且可以用于定量监测某种RNA的含量。检测基因表达的方法,参见Northern Blot法。RT-PCR的关键步骤是在RNA的反转录,要求RNA模版为完整的且不含DNA、蛋白质等杂质。常用的反转录酶有两种,即鸟类成髓细胞性白细胞病毒...
RT-PCR使RNA检测的灵敏性提高了几个数量级,使一些极为微量RNA样品分析成为可能。该技术主要用于:分析基因的转录产物、获取目的基因、合成cDNA探针、构建RNA高效转录系统。合成选择 合成cDNA引物的选择 1. 随机六聚体引物:当特定mRNA由于含有使反转录酶终止的序列而难于拷贝其全长序列时,可采用随机六聚体引物这一...
1.定义:是以RNA为模板,联合逆转录反应(reverse transcription,RT)与PCR,可用于检测单个细胞或少数细胞中少于10个拷贝的RNA模板。 RNA扩增包括两个步骤: 在单引物的介导下和逆转录酶的催化下,合成RNA的互补cDNA;加热后cDNA与RNA链解离,然后与另一引物退火,并由DNA聚合酶催化引物延伸生成双链靶DNA, 最后扩增靶DNA。
分析测试百科网,RT-PCR,反转录·聚合酶链反应(reverse transcription-polymerase chain reaction, RT-PCR)是将RNA的反转录(reverse transcription )和cDNA的聚合酶链式扩增(PCR)相结合的技术。
参考答案:是一种通过PCR进行cDNA末端快速克隆的技术,是以mRNA为模板反转录成cDNA第一链后用PCR技术扩增出某个特异位点... 点击查看完整答案 3.名词解释cDNA library:cDNA文库 参考答案: 是指某生物某一发育时期所转录形成的cDNA片段与某种载体连接而成的克隆的集合。 4.名词解释Cosmid vector:黏粒载体 参考答案...
半定量反转录-聚合酶链反应通过mRNA反转录成cDNA,再进行PCR扩增,并测定PCR产物的数量,可以推测样品中特异mRNA的相对数量。以半定量RT-PCR为基础建立起来的mRNA含量测定技术,较含内标化的RT-PCR定量测定的mRNA的方法更为简便可行。测定体内目的基因的表达增加减少与否,即通过目的基因跑出来的电泳带与管家基因(如β...
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线虫传多面体病毒属病毒RT-PCR筛查方法 《线虫传多面体病毒属病毒RT-PCR筛查方法》是2015年9月1日实施的行业标准。起草单位 厦门出入境检验检疫局、云南省烟草农业科学研究院、北京出入境检验检疫局等。起草人 林石明、廖富荣、方敦煌等。