RT-qPCR技术的全称是实时荧光定量逆转录PCR(Real-time Reverse Transcription - PCR)。这是一种将逆转录反应(RT)与实时荧光定量聚合酶链式反应(qPCR)相结合的分子生物学技术,其原理及步骤如下: 一、技术原理 RT-qPCR以RNA为起始材料,主要分为两个阶段: 逆转录阶段(RT):此阶段运用逆转录酶以RNA为模板形成互补的...
🔄RT-qPCR,即逆转录实时定量聚合酶链式反应,是一种将逆转录反应与实时荧光定量聚合酶链式反应相结合的分子生物学技术。📌技术原理:RT-qPCR以RNA为起始材料,在逆转录阶段,利用逆转录酶将RNA模板转化为互补的DNA链(cDNA)。🌟技术特点: 高灵敏度:能够检测到微量的RNA分子,适用于低丰度基因的表达分析。 高特异性...
RT-QPCR 是Q-PCR的一种,应用广泛,包括: 扩增特异性分析 基因定量分析 基因分型 SNP 分析 常用方法: SYBR Green I非特异性方法 Taqman 水解探针特异性方法 二、SYBR Green I 非特异性方法 SYBR Green I 染料 与双链 DNA 结合,荧光信号强度与双链 DNA 数量相关。 实验前准备 试剂与耗材: 特异性 PCR 引物 ...
总之,RT-qPCR是一种非常有用的分子生物学技术,可以用于研究基因表达、病毒检测、食品安全检测和药物筛选等领域。尽管存在一些局限性,但通过设计和实验优化可以克服这些问题。随着技术的不断发展,RT-qPCR将在未来发挥更广泛的作用。 文献阅读推荐 [1] "聚合酶链式反应 (PCR):原理、技术和应用",作者:Michael H. M...
RT-QPCR基本原理和概念 实时荧光定量PCR(Real-time Quantitative PCR)是一种在DNA扩增反应中,以荧光化学物质测每次聚合酶链式反应(PCR)循环后产物总量的方法。通过在PCR反应体系中加入荧光染料(SYBR Green)或荧光标记的特异性的探针,与DNA产物特异性结合,对PCR产物进行标记跟踪,实时在线监控反应过程,结合相应的软件可以...
RT-qPCR 定义:RT-qPCR是逆转录实时定量聚合酶链反应(Real-Time Quantitative Reverse Transcription PCR),结合了逆转录PCR和实时定量PCR技术,可用于对RNA分子进行定量分析。首先通过反转录酶将RNA转录为cDNA,然后利用qPCR技术对cDNA进行定量分...
Ps:Real-time PCR和qPCR是一码事,都是实时荧光定量PCR。 (3)数字PCR 数字PCR(Digital PCR,Dig-PCR,dPCR)即第三代PCR技术,是对原始PCR的另一种改进,是一种能够实现核酸绝对定量的精准检测技术。 基于泊松分布原理,数字PCR技术核酸样品分配到大量独立、平行的微反应单元中,使每个反应室中平均只有一个拷贝或者没...
RT-qPCR技术是一种广泛应用于分子生物学领域的技术，用于检测和定量分析RNA的表达水平。本文将介绍RT-qPCR技术的基本概念、工作原理、优点和应用范围，并探讨其在基因表达分析和病毒检测中的应用。与其他方法相比，RT-qPCR技术具有许多优点，但在应用中也有一些挑战和注意事项。RT-qPCR技术的基本概念 1什么是RT-qPCR...
(Real-time RT-PCR,RT-qPCR) Real-time RT-PCR是qPCR和RT-PCR的组合,其中的“RT”是Reverse tranion(逆转录)的意思,所以RT-qPCR就是结合了荧光定量技术的逆转录PCR,即以mRNA或总RNA为模板,先反转录得到cDNA,再以cDNA为模板,通过荧光定量PCR进行定量检测分析。因为RT-PCR只可以定性,但不能进行定量分析。