RT-PCR已被广泛应用于多种分子生物学应用中,包括基因表达分析、基因测试、RNA干扰验证检测、微阵列验证、病原体检测和疾病研究。 RT-PCR的方法之一步法和两步法 RT-PCR其操作方法分为两种,即一步法和两步法。一步法RT-PCR,逆转录同PCR扩增结合在一起,即cDNA合成与...
RT-PCR提取的RNA主要是rRNA,即核糖体RNA,但很少有人用它做些什么,倒是含量较少的mRNA,即信使RNA是中心法则所述的遗传信息表现的中转站,所以我们要把微量的信使RNA弄出来,更重要的是,RNA太容易分解了,环境中无处不在的RNA酶,以及其容易被水解的特点啊,我们不得不尽快把珍贵的信使RNA转化成稳定的形式,于是就有...
RT-PCR提取的RNA主要是rRNA,即核糖体RNA,但很少有人用它做些什么,倒是含量较少的mRNA,即信使RNA是中心法则所述的遗传信息表现的中转站,所以我们要把微量的信使RNA弄出来,更重要的是,RNA太容易分解了,环境中无处不在的RNA酶,以及其容易被水解的特点啊,我们不得不尽快把珍贵的信使RNA转化成稳定的形式,于是就有...
1.取0.5 ml PCR管,依次加入下列试剂:第一链cDNA 2 μl;上游引物(10 pM)2 μl;下游引物(10 pM)2 μl;dNTP(2 mM) 4 μl;10×PCR buffer 5 μl;Taq 酶(2 u/μl)1 μl; 2.加入适量的ddH2O,使总体积达50 μl。轻轻混匀,离心; 3.设定PCR程序。在适当的温度参数下扩增28-32个循环。为了保证...
模板(template)、引物(primers)、底物(dNTP)、DNA聚合酶、PCR缓冲液(PCR buffer)。
一、PCR反应:(25ul反应体系) 每管内容:加样顺序及方法: ①. 1只Eppendorf管,依次加入: MQ水: 17.5ul MQ水:17.5ul×___ 管= buffer: 2.5ul buffer: 2.5ul×___ 管= dNTP: 0.5ul dNTP: 0.5ul×___ 管= MgCl: 0.5ul MgCl: 0.5ul×___ 管= ...
目前,本公司主营产品包括:伯乐bio-rad荧光定量PCR仪(cfx 96 touch,cfx 384 touch,cfx connect),梯度PCR仪(T100,S1000,C1000 touch),电穿孔仪(micro pulser,gene pulser xcell),细胞计数仪(TC20),电泳垂直转印系统(1658033),水平电泳(subcell)蛋白转印仪(turbo 1704150),凝胶成像仪(geldco go,chemidoc xrs+,...
QIAGEN One-Step RT-PCR Kit包含Omniscript逆转录酶和Sensiscript逆转录酶的混合物、HotStarTaq DNA Polymerase、QIAGEN OneStep RT-PCR Buffer、dNTP混合液和Q-Solution。Q-Solution是一种新型的辅助剂,有助于实现“困难”模板(如:高GC含量的模板)的高效扩增。简单的单管反应体系构建和优化的试剂盒组分确保了结果成功...
1.取0.5 ml PCR管,依次加入下列试剂:第一链cDNA 2 μl;上游引物(10 pM)2 μl;下游引物(10 pM)2 μl;dNTP(2 mM) 4 μl;10×PCR buffer 5 μl;Taq 酶(2 u/μl)1 μl; 2.加入适量的ddH2O,使总体积达50 μl。轻轻混匀,离心; 3.设定PCR程序。在适当的温度参数下扩增28-32个循环。为了...