逆转录PCR(reverse transcription PCR)或者称反转录PCR(reverse transcription-PCR, RT-PCR),是聚合酶链式反应(PCR)的一种广泛应用的变形。在RT-PCR中,一条RNA链被逆转录成为互补DNA,再以此为模板通过PCR进行DNA扩增。技术介绍 由一条RNA单链转录为互补DNA(cDNA)称作“逆转录”,由依赖RNA的DNA聚合酶(逆...
rt-pcr,逆转录PCR(reverse transcription PCR)或者称反转录PCR(reverse transcription-PCR, RT-PCR),是聚合酶链式反应(PCR)的一种广泛应用的变形。在RT-PCR中,一条RNA链被逆转录成为互补DNA,再以此为模板通过PCR进行DNA扩增。
逆转录-聚合酶链反应 (Reverse Transcription-Polymerase Chain Reaction,RT-PCR)的原理是:提取组织或细胞中的总RNA,以其中的mRNA作为模板,采用Oligo(dT)或随机引物利用逆转录酶反转录成cDNA。再以cDNA为模板进行PCR扩增,而获得目的基因或检测基因表达。作用 RT-PCR使RNA检测的灵敏性提高了几个数量级,使一些极...
PCR是聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction)的简称,是一种体外扩增特定DNA片段的分子生物学技术。PCR技术自问世以来,在生物科学领域、分子诊断领域、亲子鉴定、法医鉴定以及犯罪调查等方面发挥了巨大作用,是迄今为止最为重要的技术之一。经过演化和革新,PCR技术已经发展了三代:普通PCR技术、实时荧光定量PCR技术(...
RT-PCR就是逆转录PCR(Reverse transcription PCR)或称为反转录PCR(Reverse transcription-PCR,RT-PCR),是以RNA为材料应用于PCR扩增中的一种实验方法。首先通过逆转录酶将总RNA或信使RNA(mRNA)转录成互补DNA(cDNA)。其次Taq DNA聚合酶以cDNA为模板进行qPCR扩增。RT-PCR已...
PCR,通常指的是普通PCR,以双链DNA为模板,以dNTP为底物,定性扩增双链DNA。 PCR(Polymerase Chain Reaction),中文全称为聚合酶链式反应,是分子生物学研究中最为广泛应用的技术。在70年代的时候首次报道使用聚合酶及合成引物进行单链DNA的扩增,但直到1983年才正式作为一种研究工具用于DNA的扩增。 1983年,美国生物化学家...
PCR(Polymerase Chain Reaction)即聚合酶链式反应,是指在 DNA 聚合酶催化下,以母链 DNA 为模板,以特定引物为延伸起点,反应体系中加入 dNTP、Mg2+ 等原料,通过变性、退火、延伸等步骤,体外复制出与母链模板 DNA 互补的子链 DNA 的过程,可快速特异性地在体外扩增目的 DNA[1][2]。知识链接 Ct 值 (Cycle...
我心目中检测技术史上的几次革命性发明分别是基于抗原抗体特异性结合原理的免疫标记技术,PCR技术和测序技术。今天我们来聊聊PCR技术。 按照PCR技术的演进,人们习惯性的将PCR技术划分为三代:普通PCR技术,实时荧…
RT-PCR:逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)是一种把RNA分子转录为cDNA后,在体外进行DNA扩增的技术。RT-PCR技术结合了反转录和PCR两个步骤,主要用于RNA分子的扩增和检测,如基因转录水平分析、miRNA表达研究等。 RT-qPCR:逆转录实时定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)是一种结合了逆转录PCR和实时定量PCR的技术,可以对RNA分子...