RT-PCR的指数扩增是一种很灵敏的技术，可以检测很低拷贝数的RNA。RT-PCR广泛应用于遗传病的诊断，并且可以用于定量监测某种RNA的含量。检测基因表达的方法，参见Northern Blot法。RT-PCR的关键步骤是在RNA的反转录，要求RNA模版为完整的且不含DNA、蛋白质等杂质。常用的反转录酶有两种，即鸟类成髓细胞性白细胞病毒...
RT-PCR使RNA检测的灵敏性提高了几个数量级，使一些极为微量RNA样品分析成为可能。该技术主要用于：分析基因的转录产物、获取目的基因、合成cDNA探针、构建RNA高效转录系统。合成选择 合成cDNA引物的选择 1． 随机六聚体引物：当特定mRNA由于含有使反转录酶终止的序列而难于拷贝其全长序列时，可采用随机六聚体引物这一...
举报 RT-PCR,就是先把RNA反转录为cDNA,再PCR扩增.如果只想检测某个基因mRNA的量,可以做northern blot,或者定量RT-PCR(荧光实时PCR) 解析看不懂?免费查看同类题视频解析查看解答 更多答案(2) 相似问题 怎样测mRNA的含量 目的mRNA如何检测 检测目的基因是否转录出mRNA的方法! 二维码 回顶部...
RT-PCR将以RNA为模板的cDNA(complement DNA)合成(即RNA的反转录(RT,reversetranscription)),同cDNA的PCR结合在一起的技术,提供了一种基因表达检测、定量和cDNA克隆的快速灵敏的方法。由于cDNA包括了编码蛋白的完整序列而且不含内含子,只要略经改造便可直接用于基因工程表达和功能研究,因此RT-PCR成为目前获得目的基因的...
RT-PCR有两种解释:\x0d1,最常用的理RT 是‘逆转录’(reverse transcription)的缩写\x0d2,现在也有人这么用:RT是‘实时’(real time)的缩写\x0d1,先说逆转录PCR:\x0d这项技术使用的‘逆转录酶’来自逆转录病毒,是一种能按照碱基互补配对原则,以脱氧核糖核苷酸为底物,以寡居dT为引物,把mRNA转换成相应DNA...
PCR主要用途包括: 1.目的基因的克隆: 利用特异性引物克隆;利用简并引物克隆 2.基因的体外突变: 采用随意设计的引物, 在体外对基因进行嵌合、缺失、点突变等改造 3.基因表达分析 4.DNA的微量分析检测: 个人识别,亲子鉴定 逆转录PCR, 又称RT-PCR RT- PCR, ReverseTranscription-Polymerase Chain Reaction, 即逆转...
RTPCR的目的是DNA扩增。 只想检测目的mRNA的量，做QRTPCR。
一、RT-PCR操作步骤 RNA抽提 方法：TRlzol法。主要成分：苯酚（具有裂解细胞和变性蛋白的作用）。RNA抽提...