答案解析 查看更多优质解析 举报 RT-PCR,就是先把RNA反转录为cDNA,再PCR扩增.如果只想检测某个基因mRNA的量,可以做northern blot,或者定量RT-PCR(荧光实时PCR) 解析看不懂?免费查看同类题视频解析查看解答 更多答案(2) 相似问题 怎样测mRNA的含量 目的mRNA如何检测 检测目的基因是否转录出mRNA的方法!
RTPCR的目的是DNA扩增。 只想检测目的mRNA的量，做QRTPCR。
RT-PCR是Reverse Transcription PCR的简称,中文名为逆转录聚合酶链反应,这是一种将RNA经过反转录酶的作用下合成cDNA,再将cDNA作为模板,扩增合成目的片段的分子生物学技术。这种技术灵敏用途广泛,不仅可以快速检测基因表达差异,还可以不必构建cDNA文库,克隆cDNA,而且RT-PCR作为模板的RNA种类不是那么严格,可以是总RNA,或者...
实时荧光定量PCR（quantitative Real-time PCR）是一种在PCR反应体系中加入荧光基团，运用Taq酶的5′-3′外切酶活性和荧光能量传递技术，把核酸扩增、杂交、光谱分析和实时检测技术结合在一起，对整个PCR反应扩增过程进行了实时监测和连续地分析扩增相关的荧光信号，监测到的荧光信号随反应变化可以绘制成一条曲线，最后通...
常用标准品包括:DNA标准品:纯化的PCR扩增片段或含有目的基因的克隆质粒。优点:易制备,储存稳定;缺点:缺少逆转录反应过程。RNA标准品:目的基因的体外转录RNA。优点:结合逆转录反应过程;缺点:制备时间长,不稳定。 5 市面上常见qPCR试剂 目前市面上,有各种各样的染料法qPCR试剂,我们该如何选择一款适用于我们的qPCR仪器...
原位PCR 常用于研究疾病的发病机理、临床过程及病理的转归、分子生物学、细胞学、分子病理学及临床诊断领域等。 具体应用举例如下: 1.在样品中目标核酸含量低,原位杂交法灵敏度不够时,可采用原位 PCR 以高特异性、高灵敏度检出样品内的微量核酸; 2.确定目的基因或病毒的亚细胞定位; ...
RT-PCR 的具体数据就是基线(baseline),荧光阈值(threshold)和Ct 值。 RT-PCR的常见标记方法: 二、实验步骤 2.1 关于实验分组——组内要有复孔,要有生物学重复。 2.2 关于引物设计的原则 ①siRNA具有物种特异性,不同的物种序列会不一样。 ②siRNA是冻干粉包装,室温下能稳定保存2-4星期。
你说的应该是real time PCR吧，注意RT其实是逆转录reverse transcription的缩写，和real time一定要分开来。常说的qPCR，qRT-PCR，都是通过实时（real time）的方法，测定样品中某个模版的起始量ct值 但是呢，由于之前RNA提取、反转等步骤，各个步骤存在不同的效率，ct值并无法真实反应样品中模版的绝对量...
有关内参:RT-PCR 内参照可以在一个管子里做(那样也是图好看一些),最好分开两管,把除了引物之外的mixture 统一配,拍照后,算目的基因和内参的比值,这就是基因表达的相对浓度。问:我曾经作过同一管的PCR ,内有act 5、in 和目的基因引物。虽然可见到两条均一条带但图片质量不理想(而且酶量、Mg2+加倍)。请教...