RT-PCR和realtimePCR可用于检测环境中的微生物和污染物。RT-PCR和realtimePCR的原理 1 反转录 将RNA转录成相应的cDNA。2 PCR 对cDNA进行多轮扩增，得到大量DNA。3 realtimePCR 实时检测PCR反应过程中产生的荧光信号量，精确测量DNA的定量和扩增。实验室设备和试剂 PCR仪器 保证反应温度和时间的控制。移液器 精确...
reverse-transcription polymerase chain reaction (RT-PCR) 和 real-time RT-PCR都是分子生物学中用于检测和分析RNA的实验室技术,但它们在操作和数据分析上有所不同。 RT-PCR(逆转录聚合酶链反应) 基本原理: RT-PCR首先通过逆转录酶将RNA模板转化为cDNA(互补DNA)。 随后,利用DNA聚合酶进行常规的PCR扩增,产生...
2. 实时荧光定量PCR（Quantitative Real-time PCR, qPCR）实时荧光定量PCR，也叫Real-Time PCR，即二代PCR，是指在PCR扩增反应体系中加入荧光染料或者荧光基团，在整个PCR过程中通过收集荧光信号实时监测每一个循环中扩增产物量的变化，最后通过标准曲线和CT值对待测样品进行定量分析。qPCR常用的有两种方法：SYBR Green...
我心目中检测技术史上的几次革命性发明分别是基于抗原抗体特异性结合原理的免疫标记技术,PCR技术和测序技术。今天我们来聊聊PCR技术。 按照PCR技术的演进,人们习惯性的将PCR技术划分为三代:普通PCR技术,实时荧光定量PCR技术和数字PCR技术,涉及到大家看得眼花的qPCR、RT-PCR、RT-qPCR、Real-Time PCR等等。下面就展开讲...
1.PCR,通常指的是普通PCR,以双链DNA为模板,以dNTP为底物,定性扩增双链DNA。 2.qPCR和Real-time PCR,指的是实时荧光定量PCR,以cDNA为模板,以dNTP为底物,对扩增出的DNA进行定量分析。 3.RT-PCR,指的是逆转录PCR,以由mRNA逆转录成的cDNA为模...
其实Rea-ltime-PCR和 qPCR(Quantitative Rea-ltime-PCR )是一码事,都是实时定量 PCR,指的是 PCR 过程中每个循环都有数据的实时记录,因此可以对起始模板数量进行精确的分析。 虽然Real-time PCR( 实时荧光定量PCR)和 Reverse transcription PC...
(2)实时荧光定量PCR 实时荧光定量PCR(Real-time PCR,Quantitative Real-time PCR,qPCR),即第二代PCR技术,是指在整个扩增的过程中,引入了荧光染料或者荧光基团,随着DNA数量的成倍增加,反应体系中的荧光信号也会增强。 在整个PCR反应过程中,借助对荧光信号的强弱进行检测实时监测每一个循环中扩增产物量的变化,最后通...
Real-time RT-PCR是qPCR和RT-PCR的组合,其中的“RT”是Reverse transcription(逆转录)的意思,所以RT-qPCR就是结合了荧光定量技术的逆转录PCR,即以mRNA或总RNA为模板,先反转录得到cDNA,再以cDNA为模板,通过荧光定量PCR进行定量检测分析。因为RT-PCR只可以定性,但不能进行定量分析。与RT-PCR一样,RT-qPCR定量分析...
Real-time RT-PCR 中间的 “ RT ”是 reverse transcription(逆转录),整个意思就是利用 mRNA 或总RNA 为模板的实时逆转录 PCR 技术(quantitative Real-time RT-PCR)。 real time RT-PCR 指的是 qPCR+RT-PCR 的组合,是说将 mRNA 逆转录为 cDNA 后再作为模板进行实时荧光 PCR 分析,因为 RT-PCR 是可以定性...
Real-time PCR与RT-PCR是两种不同的PCR方法,适用范围也不同。 Real-time PCR中文译作“实时聚合酶链反应”,是一种最新发展的定量PCR技术。该技术借助于荧光信号来检测PCR产物,一方面提高了灵敏度,另一方面还可以做到PCR每循环一次就收集一个数据,建立实时扩增曲线,准确地确定CT值,从而根据CT值确定起始DNA拷贝数,做...