在转基因的上游插入一个由新霉素抗性基因（NeoR，阳性选择标记）和三个聚腺苷酸（pA）位点组成的终止转录盒（STOP casscatte）。● 第二种策略为条件性敲入，也就是第一种策略的变体，通过分别插入位于终止转录盒（STOP casscatte）两侧的loxP位点来实现的（图b）。在这种情况下，终止转录盒的存在可以阻止转基因的...
在转基因的上游插入一个由新霉素抗性基因(NeoR,阳性选择标记)和三个聚腺苷酸(pA)位点组成的终止转录盒(STOP casscatte)。 ● 第二种策略为条件性敲入,也就是第一种策略的变体,通过分别插入位于终止转录盒(STOP casscatte)两侧的loxP位点来实现的(图b)。在这种情况下,终止转录盒的存在可以阻止转基因的表达,而...
The second strategy is conditional knockin (cKI), a variant of the first strategy which is achieved by inserting loxP sites on both sides of stop cassette (Figure b). In this case, the presence of the termination box can prevent the expression of the transgene. Upon mating with CRE expressi...
We then generated two reporter lines of mice by inserting EYFP or ECFP cDNAs into the ROSA26 locus, preceded by a loxP-flanked stop sequence. These strains were tested by crossing them with transgenic strains expressing Cre in a ubiquitous (尾-actin-Cre) or a cell-specific (Isl1-Cre and ...
An engineered light-inducible chloride pump, Natronomonas pharaonis halorhodopsin 3 (eNpHR3) enables temporally and spatially precise inhibition of genetically defined cell populations in the intact nervous tissues. In this report, we show the generation
For a Cre reporter knock in, a splice acceptor (SA), a promoterless tdTomato gene, and an inverted EGFP (iEGFP) gene was inserted between the homologous arms. The loxP and mutant loxP2272 sites were arranged to flank the tdTomato and iEGFP genes. (Fig. 2A) Microinjection and embryo...
此外,为了监测转基因在体内的表达,可以在转基因下游克隆一个两侧有frt位点的IRES-GFP盒。 图片来源:Creative Biolabs官网 Rosa26的应用 Rosa26位点靶向方法允许高频率的正确插入和稳定的单拷贝基因插入表达。结合Cre-loxp系统,可以实现对基因表达的时间和细胞类型的特异性控制。更重要的是,作为一种靶向基因敲入策略,所...
此外,为了监测转基因在体内的表达,可以在转基因下游克隆一个两侧有frt位点的IRES-GFP盒。 图片来源:Creative Biolabs官网 Rosa26的应用 Rosa26位点靶向方法允许高频率的正确插入和稳定的单拷贝基因插入表达。结合Cre-loxp系统,可以实现对基因表达的时间和细胞类型的特异性控制。更重要的是,作为一种靶向基因敲入策略,所...
此外,为了监测转基因在体内的表达,可以在转基因下游克隆一个两侧有frt位点的IRES-GFP盒。 图片来源:Creative Biolabs官网 Rosa26的应用 Rosa26位点靶向方法允许高频率的正确插入和稳定的单拷贝基因插入表达。结合Cre-loxp系统,可以实现对基因表达的时间和细胞类型的特异性控制。更重要的是,作为一种靶向基因敲入策略,所...
此外,为了监测转基因在体内的表达,可以在转基因下游克隆一个两侧有frt位点的IRES-GFP盒。 图片来源:Creative Biolabs官网 Rosa26的应用 Rosa26位点靶向方法允许高频率的正确插入和稳定的单拷贝基因插入表达。结合Cre-loxp系统,可以实现对基因表达的时间和细胞类型的特异性控制。更重要的是,作为一种靶向基因敲入策略,所...