RNA pull down是检测RNA结合蛋白与其靶RNA之间相互作用的主要实验方法之一。使⽤体外转录法标记⽣物素RNA探针，然后与胞浆蛋⽩提取液孵育，形成RNA-蛋⽩质复合物。该复合物可与链霉亲和素标记的磁珠结合，从⽽与孵育液中的其他成分分离。复合物洗脱后，通过WB 实验检测特定的RNA 结合蛋⽩是否与RNA 相互作...
RNA pull-down的主要目的是通过特定的RNA分子(通常是已知的非编码RNA或mRNA的片段)来富集与之相互作用的蛋白质,以便进一步研究这些相互作用的性质和功能。RNA pull-down的基本步骤如下:① RNA标记:首先,标记目标RNA分子(通常是合成的in vitro转录RNA),通常使用生物素(biotin)标记。这种标记的RNA片段可以被用作“鱼饵...
实验教学~RNA-蛋白Pull-Down 目的: 寻找与RNA相互作用的蛋白质 步骤: (1)RNA结合到链霉亲和素磁珠 1)加入50μl链霉亲和素磁珠到1.5ml的EP管,将EP管放入磁力架,吸去液体; 2)加入50μlpH7.520mMTris重悬磁珠; 3)重复步骤1,2; 4)将EP管放入磁力架,吸去液体; 5)加入50μl1×RNACaptureBuffer重悬磁珠; 6...
产品名称 磁性RNA-蛋白Pull-Down试剂盒 产品规格 20T 用途范围 仅供科研实验用途 是否进口 是 加工定制 否 包装规格 0.1kg 产地 美国 英文名 PIERCE MAGNETIC RNA PULL-DOWN KIT 库存 现货 可售卖地 北京;天津;河北;山西;内蒙古;辽宁;吉林;黑龙江;上海;江苏;浙江;安徽;福建;江西;山东;河南;湖北;湖南...
RNA-pulldown 实验可以在体外样品中通过高亲和性的标签(例如生物素,biotin),选择性地获取蛋白-RNA复合物。RNA探针可以是生物素化标记的,和细胞裂解液或者重组蛋白孵育后,通过strepavidin agarose 或者磁珠进行分离。分离后获得的蛋白可以通过western blot 或者质谱(mass spectrometry)来进行分析。这是一种研究lncRNA和蛋白...
一.RNA pull down 技术应用 1.癌症肿瘤相关调控机制研究 LncRNA发挥功能的方式很广,可以与蛋白、DNA和RNA相互作用,参与多种生物学过程的调控,主要包括基因组表观遗传修饰、调控转录翻译、发挥ceRNA、增强子RNA作用等,从而对细胞增值、分化、迁移、凋亡、免疫等发挥调控作用。
RNA pull down是一种流行的以 RNA 为中心研究RNA-蛋白质相互作用的方法。用于分离RNA 结合蛋白复合物的方法可分为两大类:体外和体内纯化策略。迄今为止,大多数已知的RNA-蛋白质相互作用已使用体外RNA 下拉分析确定。RNP 复合物的体外重组采用了各种 RNA 标记策略,例如共价连接、生物素标记或适体,确保目标RNA 固定...
RNA-蛋白Pull-Down的原理是将RNA与链霉亲和素磁珠结合。之后在蛋白质-RNA结合缓冲液中平衡RNA结合的磁珠,再加入蛋白裂解液。随后添加适当的缓冲液、涡旋振荡,并在磁力架上分离,洗涤磁珠。最后样品可通过非变性的生物素洗脱缓冲液或SDS- PAGE上样缓冲液洗脱,用于下游分析。
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RNA-蛋白Pull-Down的原理是将RNA与链霉亲和素磁珠结合。之后在蛋白质-RNA结合缓冲液中平衡RNA结合的磁珠,再加入蛋白裂解液。随后添加适当的缓冲液、涡旋振荡,并在磁力架上分离,洗涤磁珠。最后样品可通过非变性的生物素洗脱缓冲液或SDS- PAGE上样缓冲液洗脱,用于下游分析。 目的: 寻找与RNA相互作用的蛋白质 步骤: ...