RNA pull down是检测RNA结合蛋白与其靶RNA之间相互作用的主要实验方法之一。使⽤体外转录法标记⽣物素RNA探针，然后与胞浆蛋⽩提取液孵育，形成RNA-蛋⽩质复合物。该复合物可与链霉亲和素标记的磁珠结合，从⽽与孵育液中的其他成分分离。复合物洗脱后，通过WB 实验检测特定的RNA 结合蛋⽩是否与RNA 相互作...
实验教学~RNA-蛋白Pull-Down 目的: 寻找与RNA相互作用的蛋白质 步骤: (1)RNA结合到链霉亲和素磁珠 1)加入50μl链霉亲和素磁珠到1.5ml的EP管,将EP管放入磁力架,吸去液体; 2)加入50μlpH7.520mMTris重悬磁珠; 3)重复步骤1,2; 4)将EP管放入磁力架,吸去液体; 5)加入50μl1×RNACaptureBuffer重悬磁珠; 6...
RNA pull-down的基本步骤如下:① RNA标记:首先,标记目标RNA分子(通常是合成的in vitro转录RNA),通常使用生物素(biotin)标记。这种标记的RNA片段可以被用作“鱼饵”来捕获与其相互作用的蛋白质。② RNA与细胞提取物相互作用:标记的RNA片段被加入细胞或组织的提取物中,使其和与之相互作用的蛋白质结合形成RNA-蛋白质...
RNA领域,尤其是非编码RNA研究的快速发展,催生了多种RBPs–RNAs互相作用鉴定技术。 二.RNA pull down实验内容 使用体外转录法标记生物素RNA探针,然后与胞浆蛋白提取液孵育,形成RNA-蛋白质复合物。该复合物可与链霉亲和素标记的磁珠结合,从而与孵育液中的其他成分分离。复合物洗脱后,通过western blot实验检测特定的RNA...
产品名称 磁性RNA-蛋白Pull-Down试剂盒 产品规格 20T 用途范围 仅供科研实验用途 是否进口 是 加工定制 否 包装规格 0.1kg 产地 美国 英文名 PIERCE MAGNETIC RNA PULL-DOWN KIT 库存 现货 可售卖地 北京;天津;河北;山西;内蒙古;辽宁;吉林;黑龙江;上海;江苏;浙江;安徽;福建;江西;山东;河南;湖北;湖南...
RNA pull down是一种流行的以 RNA 为中心研究RNA-蛋白质相互作用的方法。用于分离RNA 结合蛋白复合物的方法可分为两大类:体外和体内纯化策略。迄今为止,大多数已知的RNA-蛋白质相互作用已使用体外RNA 下拉分析确定。RNP 复合物的体外重组采用了各种 RNA 标记策略,例如共价连接、生物素标记或适体,确保目标RNA 固定...
RNA pull down是用于检测RNA结合蛋白与其靶RNA之间互作的实验手段。RNA pull down使用体外转录法标记生物素RNA探针,然后与胞浆蛋白提取液孵育,形成RNA-蛋白质复合物。该复合物可与链亲和素标记的磁珠结合,从而与孵育液中的其他成分分离。复合物洗脱后,通过Western Blot实验检测特定的RNA结合蛋白是否与RNA相互作用。也...
LncRNA主要通过与其他分子相互作用发挥功能,包括RNA,DNA和蛋白。其中,LncRNA与蛋白的互作是近几年的研究热点,小又今天给大家介绍的就是研究RNA与蛋白互作的方法——RNA pull down。 进入正题之前,先通过一篇Nature Communications的文章“The LINC01138 dr...
RNA Pulldown实验,是一项用于筛选与靶RNA结合的蛋白质的定性实验。 通过体外转录法或合成生物素标记RNA探针,与细胞裂解液孵育,形成生物素-RNA-蛋白质复合物。 该复合物可与链霉亲和素磁珠结合,从而将靶RNA结合的蛋白从细胞裂解液中分离出来。
DNA pull-down实验首先针对靶标区域设计特异性DNA探针,探针经过脱硫生物素标记,跟偶联在磁珠上的链霉亲和素结合;细胞核提取物与磁珠-DNA探针孵育,作用蛋白质分子可以和DNA探针特异性结合;纯化出与靶DNA片段结合的蛋白复合体,经过洗涤可...