简单来说, RNA pulldown 和 RIP ,前者是已知 RNA 拉蛋白,后者是已知蛋白去拉 RNA。 RNA pulldown 和 RIP 是分子机制研究中可以用于相互佐证的两个经典技术。 2、RNA pulldown 的阴性对照探针如何选择? RNA pulldown 阴性探针一般有 lacZ 探针和目的 RNA antisense 反义链探针两种类型。 lacZ 探针是通用阴性对...
RNA pulldown的原理是用生物素标记RNA模拟目的RNA与蛋白直接孵育结合,这就要求探针序列要与目的RNA序列一致,而生物素标记探针只能是线性的,要和circRNA序列尽量保持一致,就要求探针序列要在circRNA全长基础上延长一段circRNA独有的接头序列,来更接近circRNA环状的序列。 RNA pulldown实验是很成熟的,原理也是被公认的,而...
RNA pull down:RNA沉淀检测,是检测RNA结合蛋白与其靶RNA之间相互作用的主要实验方法之一。使用体外转录将RNA进行生物素标记,并与细胞蛋白裂解液孵育,形成RNA-蛋白复合物。复合物通过磁珠结合后分离,复合物纯化洗脱后通过Western blot验证检测特性的蛋白。若筛选可能结合的蛋白通过质谱实验进行检测筛选。 实验流程: 2.1生物...
图4 我司RNA Pull-down案例展示：（A）体外转录法电泳检测图（阳性），左图：PCR扩增DNA的电泳；右图：体外转录标记RNA的电泳；（B）RNA Pull-down的银染结果；（C）MS差异蛋白鉴定及KEGG分析。伯远医学拥有一流的技术团队、丰富的项目经验，提供专业RNA Pull-down技术服务，适用于RNA与蛋白结合的领域研究，欢迎大...
RNA pull down:RNA沉淀检测,是检测RNA结合蛋白与其靶RNA之间相互作用的主要实验方法之一。使用体外转录将RNA进行生物素标记,并与细胞蛋白裂解液孵育,形成RNA-蛋白复合物。复合物通过磁珠结合后分离,复合物纯化洗脱后通过Western blot验证检测特性的蛋白。若筛选可能结合的蛋白通过质谱实验进行检测筛选。
RNA pull-down是检测RNA结合蛋白与RNA之间相互作用的主要实验手段之一。该技术利用体外合成生物素标记RNA...
RNA pull down：RNA沉淀检测，是研究RNA结合蛋白与其靶RNA之间相互作用的关键实验技术。该方法首先将体外转录的RNA生物素标记，然后与细胞蛋白裂解液混合，形成RNA-蛋白复合物。通过磁珠将复合物分离，随后纯化并洗脱复合物，使用Western blot验证特定蛋白的检测特性。若需筛选潜在结合蛋白，则可通过质谱实验...
RNA pull-down是检测RNA结合蛋白与其靶RNA相互作用的主要技术之一，是近年来研究IncRNA、circRNA与蛋白质相互作用的主要手段。 RNA pull-down实验原理 RNA pull down 使用体外转录来标记生物素 RNA 探针，然后将其与胞质蛋白质提取物一起孵育以形成 RNA-蛋白质复合物。 这种复合物可以与链霉亲和素标记的磁珠结合，...
上次Andy介绍到RNA pull-down的原理和做该实验的准备工作,在万事俱备以后,就可以开始为期三天的正式实验了。我们这次的实验流程是采用的生物素标记的磁珠法,也是比较常规的一种方法~ RNA pull-down assay using Streptavidin magnetic beads 1 RNA pull-down 第一天——生物素探针标记RNA ...
除此之外，有时候我们还会见到pull-down实验，例如GST pull-down、RNA pull-down，这种又是什么实验？跟前面介绍的几种免疫沉淀又有什么联系和区别呢？下期我们继续聊聊这些问题，敬请期待。汉恒生物专注病毒包装十余年，有丰富的实战经验，有多种蛋白标签可供选择，以满足不同实验对标签使用的需求，如有产品需求或...