当进行RNA pull-down实验时,可以根据不同的需求选择不同的下游检测方法。以下是几种常见的下游分析方法及其结果的解释: 1. 蛋白质鉴定 可以使用质谱分析等方法对拉取到的蛋白质进行鉴定,从而确定RNA与哪些蛋白质发生了相互作用。对于蛋白质鉴定结果,需要关注鉴定出的蛋 白质是否具有重要的生物学功能,是否与RNA相关。
3. 全基因组分析 通过扩大性分析,可以在pull-down实验中发现大量潜在的RNA结合蛋白质或RNA分子。最近,通过定向密集了解并且对全基因组探针进行逐一筛 查配对拉下实验证明神经退行性疾病(如帕金森氏症和肌萎缩侧索硬化)与多个mRNAs具有相同的RNA结合伴侣。 总之,RNA pull-down实验结果分析需要根据检测模块及有关的科学...
看过来手把手教你!!!(二) 3505 1 10:28 App GST pull down实验不会做?看过来,手把手教你!!!(四) 622 0 02:09 App DNA pull-down实验结果解读,前后怎么看? 4168 5 12:08 App GST pull down 实验不会做?看过来 手把手教你(三) 浏览方式(推荐使用) 哔哩哔哩 你感兴趣的视频都在B站 打开...
8、将吸附柱CB2放入一个新的离心管中,向吸附膜中间位置滴加30μl洗脱缓冲液EB,室温放置2min,12,000rpm离心1min,收集DNA溶液。 5实验结果 l正义链和反义链PCR扩增琼脂糖凝胶图 Marker:DL2000 Sense:正义链产物 Antisense:反义链产物 二.RNA-RNApull down实验 1实验目的:通过RNA-RNA pull down实验,在细胞中获...
通过Western blot检测结果,我们可以看到GST-a蛋白和b蛋白所对应的条带,即表明了a蛋白和b蛋白因发生相互作用而被GST-a pull down(GST对照只显示一个条带)。 2.GST pull down实验步骤 GST-a融合蛋白的制备 1.GST-a融合蛋白的表达 (1)将目的蛋白与GST的重组质粒转化到BL21菌株中; (2)挑取单克隆到含有5ml LB...
rna pulldown结果分析 1、 实验简介 RNA pull down是用于检测RNA结合蛋白与其靶RNA之间互作的实验手段。RNA pull down使用体外转录法标记生物素RNA探针,然后与胞浆蛋白提取液孵育,形成RNA-蛋白质复合物。该复合物可与链亲和素标记的磁珠结合,从而与孵育液中的其他成分分离。复合物洗脱后,通过Western Blot实验检测...
Pull-down实验不需要精确定量,加入过量探针即可。 样本处理🧴 问题: 细胞裂解物裂解时要不要加蛋白酶抑制剂和RNA酶抑制剂? 解析: 为了保护目标RNA和蛋白质,防止降解或修饰,建议加入蛋白酶和RNA酶抑制剂。 结果分析🔍 问题: 发现多个互作蛋白,如何选择继续研究的蛋白? 解析: 根据研究的方向或相关功能筛选蛋白,...
RNA Pull-down作为研究RNA与蛋白互作的核心技术，是使用体外转录法标记生物素RNA探针，然后与胞浆蛋白提取液孵育，形成RNA-蛋白质复合物。该复合物可与链霉亲和素标记的磁珠结合，通过生物素与链霉亲和素的非共价亲和作用，使其与孵育液中的其他成分分离。复合物洗脱后，如果检测蛋白为已知蛋白，可通过Western blot...
在这段不得不在家充电的非常时期,小编无意中看到一种叫做RNA pull-down的实验技术,估计有很多小伙伴和小编一样第一次接触这种技术,一脸懵逼,那我们就来一起了解下吧。 RNA pull-down实验原理 RNA pull-down是检测RNA结合蛋白与其靶RNA之间相互作用的主要实验手段之一。使用体外转录法标记生物素RNA探针,然后与胞浆...