RIP主要是运用抗目标蛋白的抗体把相应的RNA-蛋白复合物沉淀下来,经过分离纯化就可以对结合在复合物上的RNA 进行q-PCR验证或者测序分析。RIP 是研究细胞内RNA 与蛋白结合情况的技术,是了解转录后调控网络动态过程的有力工具,可以帮助我们发现miRNA 的调节靶点。 RIP技术原理 RNA免疫沉淀常用来研究mRNA的转录与转录后的...
CHIP实验是一种用于检测蛋白质与DNA特定区域相互作用的技术。它可以帮助研究人员了解转录因子、组蛋白修饰...
通过IP的方法富集蛋白,检测与其结合的DNA的方法即为ChIP;通过IP的方法富集蛋白,检测与其结合的RNA的方法即为RIP;通过IP的方法富集蛋白,检测与其结合的蛋白的方法即为coIP。 CoIP又叫免疫共沉淀,利用抗原A与蛋白质B结合,通过A的抗体(钥匙)沉淀A(锁),再利用精制的proteinA(钥匙链)预先结合到磁珠上,使之与含有抗原...
一般来说,如果某一抗体可用于IP,则说明可能也可以用于Co-IP、RIP;虽然和ChIP也没有太大区别,但是ChIP级别的抗体在纯度和特异性上都要求较高,且DNA与蛋白进行交联,若交联后蛋白的结合部位正好是抗体识别表位,就会导致抗体无法识别,导致实验失败。这种情况则需要更换其他抗体,且最好是经过ChIP实验验证的抗体,以确保实...
裂解液的量主要还是根据细胞沉淀量加的，本人做了几年RIP了，欢迎交流 请问裂解产物离心后上清很粘稠是...
免疫沉淀(ip)实验:CoIP、RIP、CHIP的区别 IP实验原理 IP又称免疫沉淀(Immunoprecipitation),是利用抗原和抗体的特异性结合以及“proteinA/G”特异性结合到抗体的FC片段的现象开发出来的方法,简单来说,抗原与抗体类似于锁和钥匙之间的关系,一把钥匙(抗体)只能开一把锁(抗原),而钥匙可以通过钥匙链(细菌蛋白的“...
RIP-Seq是一种检测细胞内蛋白/RNA互作组的高通量技术。该技术通过联合免疫共沉淀技术和RNA测序技术对目的...
实验原理及步骤 RNA结合蛋白免疫沉淀(RNA Binding Protein Immunoprecipitation, RIP)的基本原理是使用目标蛋白的抗体捕获内源性的RNA-蛋白的复合物,然后通过免疫沉淀的方法把RNA-蛋白复合物一起分离下来,然后通过RT-PCR. RIP-Seq (高通量 测序)或RIP-Chip (microarray) 来鉴定结合的RNA序列。RIP流程如下图 结果展示...
1、Native型RIP 2、Crosslink甲醛交联型RIP RIP实验流程 优先采用抗体预先结合RIP级Protein A/G 磁珠的...