目的 建立HIV-1 DNA的实时荧光定量聚合酶链反应(real-time PCR)检测方法.方法 根据HIV-1 NL4-3 LTR基因及人CCR5基因序列设计引物,构建质粒标准品,建立绝对定量检测方法,对检测方法的重复性和特异性进行评价.用该方法对20例HIV-1感染者HIV-1 DNA进行定量检测.结果 构建了HIV-1 DNA绝对定量的标准品质粒,标准...
Real-time PCR,即实时荧光定量PCR(qPCR),是一种强大的分子技术,能够在实时状态下监测和测量DNA的扩增。该技术通过对传统PCR的改进,实现了对特定DNA序列的高精度、高灵敏度和快速检测与定量。Real-time PCR的核心特征实时监测 Real-time PCR在每次扩增循环后测量PCR产物的积累,从而能够在反应的对数增长阶段进行...
实时聚合酶链式反应(Real-time PCR,RT-PCR)是一种高效、灵敏且广泛应用于分子生物学和医学研究的技术。它结合了传统PCR技术和荧光探针的使用,使我们能够实时监测PCR反应过程中目标DNA或RNA的扩增量,从而可以准确快速地定量分析样本中的特定分子。RT-PCR的工作原理非常简单,它包括三个主要步骤:逆转录、PCR扩增和...
In this chapter, an in-house HIV-1 real-time RT-PCR assay for blood donor screening is described. The procedure includes the pooling of plasma samples, viral RNA isolation, and subsequent detection of amplification in real-time one-step RT-PCR. The validation considers the specificity, the ...
Real-Time PCR和qPCR是同一个技术,只是名称不同。 RT-PCR和RT-qPCR都是用于RNA检测的技术,区别在于RT-qPCR可以实现RNA定量。 普通PCR技术 普通PCR即第一代PCR技术,以双链DNA为模板,以dNTP为底物进行扩增,特异性地扩增双链DNA的过程,然后采用琼脂糖凝胶电泳对产物进行定性分析。
Abbott雅培RealTi m e HIV-1病毒载量检测试剂技术规格 1.检测项目:HIV-1病毒载量检测 1.1检测亚型:HIV-1型M组(A-H)、O组、N组 1.2检测方法:应用RT-PCR和Real-time实时荧光定量检测技术HIV-1型各组 病毒载量 1.3 检测平台:m2000sp或m24sp自动核酸提取仪或手工核酸提取,m2000rt实 时荧光定量PCR仪 2.定量...
实时聚合酶链式反应(Real-time PCR,RT-PCR)是一种高效、灵敏且广泛应用于分子生物学和医学研究的技术。它结合了传统PCR技术和荧光探针的使用,使我们能够实时监测PCR反应过程中目标DNA或RNA的扩增量,从而可以准确快速地定量分析样本中的特定分子。 RT-PCR的工作原理非常简单,它包括三个主要步骤:逆转录、PCR扩增和荧光...
实时聚合酶链式反应(Real-time PCR,RT-PCR)是一种高效、灵敏且广泛应用于分子生物学和医学研究的技术。它结合了传统PCR技术和荧光探针的使用,使我们能够实时监测PCR反应过程中目标DNA或RNA的扩增量,从而可以准确快速地定量分析样本中的特定分子。 RT-PCR的工作原理非常简单,它包括三个主要步骤:逆转录、PCR扩增和荧光...
注意,一次实验可以同时运行相同扩增参数的多个实验(如H1N1、HIV与HCV),那么可以分别设置多个子集 设置样品:先在subset中选择本次实验的子集,点击左上角的 ,样品输入样品名,再选择标准品类型和浓度或者阳性对照/阴性对照 四.数据分析: 实验运行完成后进入 ,选择Abs Quant/Fit Ppoint,在窗口中的Subset(第二行)中...
Real-timePCR概述 实时荧光定量PCR技术于1996年由美国AppliedBiosystems公司推出,该技术是在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号的积累实时监测整个PCR进程,最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。该技术在常规PCR基础上运用荧光能量传递(fluorescenceresonanceenergytransfer,FRET)技术,加入荧光标记探针,巧妙地...