很多人误以为RT-PCR是Real-time PCR的缩写,因此将二者混为一谈,但实际上是不一样的,国际上的约定俗成的是:RT-PCR特指反转录PCR,而Real-time PCR一般缩写为qPCR(quantitative real-time PCR)(见前面的介绍)。 下面详细介绍反转录PCR (1)反转录PCR 反转录PCR(Reverse Transcription - PCR,RT-PCR),是PCR的一...
Real-time RT-PCR是qPCR和RT-PCR的组合,其中的“RT”是Reverse transcription(逆转录)的意思,所以RT-qPCR就是结合了荧光定量技术的逆转录PCR,即以mRNA或总RNA为模板,先反转录得到cDNA,再以cDNA为模板,通过荧光定量PCR进行定量检测分析。因为RT-PCR只可以定性,但不能进行定量分析。与RT-PCR一样,RT-qPCR...
Real-time PCR的中文名字是实时聚合酶链式反应,也被称作实时荧光定量PCR,简称qPCR。 需要注意的是,"Real-time PCR"与"qPCR"(Quantitative PCR),通常是指同一种技术。而RT-PCR虽然与Real-time PCR的简写相同,但试剂上是两种不同的技术。 Real-time PCR技术原理 Real-time PCR(qPCR)在PCR反应进行的同时,实时监测...
比如用这个cDNA去做qPCR,测定相对表达量,从而间接反映对应RNA的相对表达量。 #03 什么是qPCR? qPCR 特指 Quantitative Real-time PCR 的缩写(或者:Real-Time PCR;注意:不是RT-PCR),翻译成中文就是“实时定量PCR”,为第二代PCR技术。 由于严格意义上的实时定量PCR需要基于各种不同的荧光技术,通过实时检测PCR过程...
实时荧光定量PCR是一种在PCR反应中加入荧光染料或基团,并通过收集荧光信号实时监测每个循环中扩增产物量变化的PCR技术。该技术也被称为Real-Time PCR或二代PCR。最终,通过使用标准曲线和CT值来定量分析待测样品。qPCR技术用于检测病原体的存在,并确定目标DNA序列的拷贝数。
二、那什么是 qPCR、Real-time-PCR? 其实Rea-ltime-PCR和 qPCR(Quantitative Rea-ltime-PCR )是一码事,都是实时定量 PCR,指的是 PCR 过程中每个循环都有数据的实时记录,因此可以对起始模板数量进行精确的分析。 虽然Real-time PCR( 实时荧光定量PCR)...
Real-time RT-PCR,即RT-qPCR,是这两个过程的结合,首先通过逆转录将RNA转化为cDNA(即从mRNA或总RNA模板),然后使用实时荧光PCR进行定量分析。这种技术不仅能检测cDNA,还能应用到基因组DNA等模板上,实现了定性和定量的双重功能。所以,理解关键在于区分它们的不同应用和功能:RT-PCR侧重于RNA到DNA的...
PCR、qPCR、RT-PCR和Real-time PCR是分子生物学领域中常见的技术,但它们之间存在一些关键区别。首先,PCR(聚合酶链式反应)是一项基础技术,通过指数级放大DNA片段,简化了之前对DNA样本的处理。其主要步骤包括变性、退火和延伸,从而形成大量相同的DNA拷贝。qPCR(实时荧光定量PCR)是PCR的一种进阶版本,...
PCR、qPCR、RT-PCR和qRT-PCR四种技术都是基于聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)的技术,主要区别在于它们的应用领域和检测目标不同。PCR作为第一代技术主要用于体外靶基因(DNA序列)扩增和检测;qPCR可以实时定量检测DNA或cDNA的含量;RT-PCR基于mRNA合成的cDNA,实时监测并扩增获得靶基因(DNA序列)用于后续实验...