2. qPCR引物验证的方法:取普通的cDNA直接跑qPCR验证引物的可用性;普通梯度PCR+琼脂糖凝胶电泳验证引物的特异性; 3. qPCR预混反应体系(单一反应体系): 4. 上样:用排枪将预混液按15µL/孔准确加入96孔板中;然后用排枪准确加入5µL样本(制备的cDNA模板可稀释后使用),总反应体系为20µL;每个样本各设3个复...
通常获取到的序列为从剪切位点（backsplice）处打开后的线性序列，因此，在设计引物前应先进行序列位置的变换，截取3´端100-200bp长度的序列置于5´端头部，形成了一个新的序列，新序列的连接处即为剪切位点处。circRNA引物设计的方法按照常规PCR引物设计的原理，跨环化位点设计，上下游引物分别在环化位点的左右...