QPCR的英文全名是Real-time Quantitative PCR Detecting System,即实时荧光定量核酸扩增检测系统,也叫实时定量基因扩增荧光检测系统,简称QPCR。 基本信息 中文名称 QPCR 外文名称 Real-time Quantitative PCR Detecting System 又名 实时定量基因扩增荧光检测系统
图2 | PCR和qPCR的扩增过程是如何进行的,qPCR方案通常包括大约30-40个循环,每次的拷贝数会翻倍 然而,qPCR设备还包括一个荧光源和荧光仪,以激发荧光基团并检测qPCR扩增周期中产生的荧光信号(图3)。 图3 | 基于染料和探针的qPCR检测产生的荧光信号 该设备通常有或与计算机相连,记录荧光仪...
实时荧光定量聚合酶链式反应(qPCR)指的是在PCR进行的同时,对其过程进行监测的能力(即实时)。因此,数据可在PCR扩增过程中,而非PCR结束之后,进行收集。这为基于PCR的DNA和RNA定量方法带来了革命性的变革。在实时荧光定量PCR (qPCR)中,反应以循环中首次检测到目标扩增的时间...
1. 基因表达谱分析:qPCR技术能够定量特定基因在不同条件下的表达水平,为揭示基因功能、调控机制及疾病发生发展过程中的基因表达变化提供依据。 2. 病原体检测:qPCR能够快速、准确地检测出微量的病原体DNA或RNA,为疾病的早期诊断、疫情监控及治疗效果评估提供支持。 3. 遗传变异研究:利用qPCR技术,科研人员能够检测并...
而qPCR是期望对PCR反应过程的每一步都能进行监测,而不只是关注PCR最终的扩增结果。qPCR原理是一种在DNA扩增反应中,以荧光化学物质测每次聚合酶链式反应(PCR)循环后产物总量的方法,应用于对PCR进程进行实时检测。 PCR与qPCR的区别 实时监控如何实现? 就是在PCR反应体系中加入荧光基团,来实现对PCR的实时监控。目前,...
qPCR目前主要可以分为:以SYBR Green I染料法为主的荧光染料嵌合法;以Taqman探针法为主的荧光探针法。 qPCR的定量方法分为:相对定量和绝对定量。 相对定量“个人小传” 概念:用于测定两个或多个不同样品中靶基因量的差异,得到的数据是目的基因在各样本中含量的相对比例。...
经系统校正后产生。解决方法是确保 Mix 中预留的染料未降解；更换荧光信号收集更好的 qPCR 专用耗材。
多重qPCR(multiplex quantitative Polymerase Chain Reaction,mqPCR)则是结合实时定量PCR技术的多重PCR。它在多重PCR的基础上,通过添加特异性引物和探针,并利用荧光信号实时监测PCR过程,从而实现对多个DNA片段的实时定量检测。 多重qPCR探针“全家桶” 探针是一种用于探测、测量或识别目标物质的工具或技术。在科学研究和...
RT-qPCR:逆转录实时定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)是一种结合了逆转录PCR和实时定量PCR的技术,可以对RNA分子进行定量分析。RT-qPCR先通过反转录酶将RNA逆转录成cDNA,然后利用qPCR技术对cDNA进行定量分析。RT-qPCR技术广泛应用于RNA表达水平的研究,如基因表达分析、病毒载量检测等。
实时荧光定量PCR是以DNA或者cDNA为模板进行扩增、并加入荧光基团进行定量,用于检测DNA或者RNA含量,可研究某个基因在经过特定处理后转录水平的变化情况。qPCR在基因表达研究和临床疾病检测等领域已得到广泛应用,如转基因动植物检测、病原微生物或病毒含量检测、癌症检测以及药物反应个体差异的遗传基础检测、基因差异表达和基因...