DNA pull-down技术是一种研究体外DNA与蛋白互作的有效方法。与pull-down不同的是，这项技术是以特定DNA序列作为探针，研究或寻找与之相结合的蛋白，常应用于检测鉴定转录因子或组蛋白等。通常将DNA探针与生物素偶联，生物素与链霉亲和素间以高强度的非共价结合，可将DNA探针固定，以便捕获互作蛋白。DNA pull-down一...
1.技术原理：Pull down实验基于亲和层析原理，利用蛋白质之间的特异性相互作用，通过诱捕靶蛋白及其相互作用伙伴，进而对其进行分离和鉴定。该实验通常包括以下步骤：1.1选择适当的亲和剂：亲和剂是一种具有高亲和力的分子，用于捕获目标蛋白及其互作伙伴。常见的亲和剂包括抗体、蛋白结构域和配体。1.2亲和剂的固定：将...
Pull-down技术是通过以适当标签和目的基因进行融合表达作为诱饵，从细胞提取物中钓出与目的蛋白相互作用的蛋白。多组分蛋白质复合物的分离主要利用固定在琼脂糖树脂的反标签系统完成（表1）。1988年Smith等利用谷胱甘肽-S-转移酶（glutathione-transferase，GST）融合标签从细菌中一步纯化出GST融合蛋白。从此，GST融合蛋白...
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GST pull-down 是在体外验证两种蛋白质结合的方法之一，其原理是目的蛋白与GST融合表达，蛋白固定在谷胱甘肽（GSH）亲和树脂上，作为与目的蛋白亲和的支持物，起到“诱饵蛋白”的作用。 目标蛋白溶液通过柱子，从中可以捕获相互作用的“捕获蛋白”（目标蛋白）。结合物洗脱后，通过蛋白质印迹 (WB) 分析证实了两种蛋白...
DNA pull down实验技术原理—辉骏生物 生物素和链霉亲和素之间的相互作用是已知的最强烈的非共价相互作用。 其中，活化的生物素可以与几乎所有已知的由蛋白质交联剂介导的生物大分子偶联。 因此，用生物素标记核酸后，可以利用生物素和链霉亲和素之间的亲和相互作用来纯化多种生物分子复合物。 DNA 下拉实验从设计...
GSTpull-down原理：GSTpulldown是一种在体外研究蛋白质相互作用的方法。原理：利用DNA重组技术将已知蛋白与GST(GlutathioneStransferase)融合，融合蛋白通过GST与固相化在载体上的GTH（Glutathione）亲和结合。因此，当与融合蛋白有相互作用的蛋白通过层析柱时或与此固相复合物混合时就可被吸附而分离。WesternBlot GSTpull-...
RNA pulldown实验技术是一种研究RNA与蛋白质相互作用的重要工具。其原理是首先将体外转录的RNA与Beads结合，接着将其与细胞裂解液混合，目标蛋白随之吸附在Beads上。通过洗涤和洗脱步骤，分离出RNA-protein复合物，进而利用Western Blot或质谱分析鉴定特定蛋白。辉骏生物提供RNA pull-down实验服务，包括案例研究...
GST-Pull Down技术是一种有效的方法，用于验证蛋白质间的相互作用，无论是已知还是未知。其核心原理是利用GST（谷胱甘肽-S-转移酶）与GSH（谷胱甘肽）的结合特性，通过固定GSH在琼脂糖珠上，构建GST融合蛋白与GSH-琼脂糖珠的结合体系。如果环境中存在与目标蛋白X互作的蛋白Y，它们会在“GSH-琼脂糖珠-GST...