GST pull-down+GST IB组:表示GST pull-down实验后用GST进行免疫印迹。发现三组均有条带,表明GST pull-down实验体系可以正常发挥功能,也表明各组体系中含有GST相关的组分。 Input + YFP IB组:表示不经过GST pull-down实验,直接对实验前各组的混合体系用YFP进行免疫印迹,是阳性对照组表明各组有YFP相关组分。 文献...
Pull-Down的原理根据以下示意图,大家就会一目了然:而Pull-Down所获得的捕获蛋白的分析方式,如下图所示:Pull-Down与蛋白纯化实验的对比: 运用重组基因表达蛋白,再进行下游的蛋白的提取和纯化实验:两种实验步骤的异同点解析:需要实验到的产品类型:GST 标签蛋白纯化——PurKine™ 谷胱甘肽S转移酶标签 谷胱甘肽树脂MBP ...
(2)4℃,4000rpm离心5min,弃去上清液后,用预冷缓冲液进行洗涤,重复三次;(3)吸干琼脂糖凝胶上方的水层后,加入20ul 1×蛋白电泳上样缓冲液,将蛋白样本煮好后,分装冻存于-80℃冰箱,用于后续检测。4️⃣ GST pull-down 验证与结果分析GST pull-down实验经过考马斯亮蓝和Western blot检测后即可进行结果分析。
>RNA pull-down结合质谱鉴定技术首次发现了LAMP5-AS1的潜在结合蛋白—DOT1L(一种H3K79甲基转移酶) >RIP qPCR实验确定了LAMP5-AS1与DOT1L结合 >截短型 RNA pull-down实验进一步明确了与LAMP5-AS1结合的DOT1L结构域 >体外酶活实验表明LAMP5-AS1与DOT1L的结合促进了DOT1L的甲基转移酶活性 >RNA干扰结合ChIP实验表...
GST pull-down 一般用于体外实验,因为诱饵蛋白是需要加上GST标签的重组蛋白,所以是非生理状态下的验证,蛋白质的结构和形式可能与天然状态下存在一定差异,一般用于体外验证两个已知蛋白的直接相互作用。 在实验难度上,重组诱饵蛋白一般采用原核表达体系,有高效的商业化载体(真核表表达体系也可以做,但需要找到合适的载体)...
NA-Pull do..一、细胞收集(对于单层细胞或贴壁细胞)1. 准备细胞5E7细胞。2. 用10 mL冰冷的PBS洗涤培养瓶或平板上的细胞两次。3. 加入10 mL冰冷的PBS。从每个培养瓶或平板上刮下细胞,然后转移到离
步骤详解:RNA pull-down实验这么做,不走弯路! RNA pull-down实验简介,实验原理、流程图、操作方法,常见问题,通通帮你搞定!实验室小白和大神都看过来~#实验#科普#技术#RNA#青少年课外知识讲堂 13 抢首评 5 1 发布时间:2024-03-29 16:30 粉丝1211获赞3076 ...
其原理是首先将体外转录的RNA与Beads结合，接着将其与细胞裂解液混合，目标蛋白随之吸附在Beads上。通过洗涤和洗脱步骤，分离出RNA-protein复合物，进而利用Western Blot或质谱分析鉴定特定蛋白。辉骏生物提供RNA pull-down实验服务，包括案例研究如LncRNA LAMP5-AS1与DOT1L在MLL白血病中的作用，该研究发现...
英文名称: DNA pull down 总访问: 1533 国产/进口: 国产 半年访问: 112 产地/品牌: 辉骏生物 产品类别: 实验动物 规格: D04 最后更新: 2024-11-29 货号: 01 参考报价: 8000 立即询价 电话咨询 [发表评论] [本类其他产品] [本类其他供应商] [收藏] 分享:微信新浪微博销售商: 广州辉骏生物科技股份...
GST pull-down: 原核纯化蛋白与真核蛋白在试管内发生生化反应互作的结果,只要互作蛋白间具有相互结合的结构域基础即可实验证明。 Co-IP: 细胞内高表达目的蛋白,并通过IgG球珠-抗体-蛋白复合物体系,分离出互作的蛋白复合物,是细胞内的体内反应结合。 GST pull-down实验流程 ...