首先是input组,input组为阳性对照组,既未经pull down处理的试验组。为了表明实验体系没有问题。先看inp...
手把手教会你怎么看RIP和RNA pull down的结果图~ 08:08 【文献阅读】| Rescue实验到底是啥?有啥作用?怎么读图?争取一次讲明白它! 10:04 【文献阅读】| 双荧光素酶报告基因实验怎么读图?不要再被这个实验吓到啦~ 03:41 【文献阅读】| 不敢说最全,但是相对比较全的13种PCR方法都在这儿了,确定不来...
在这次实验中,通过GST pull down技术,可以有效地验证GST-Atrogin-1-wt和β-catenin之间的相互作用。具体来说,实验包括两部分,首先是通过考马斯亮蓝染色观察GST bead与GST蛋白或GST-Atrogin-1-wt的孵育效果,以及在孵育后的bead中拉取β-catenin。然后是免疫印迹技术,将相同胶上的蛋白通过转膜转移到...
GST pull-down实验经过考马斯亮蓝和Western blot检测后即可进行结果分析。 考马斯亮蓝检测:通过考染胶中纯化条带区别于未纯化样品条带的分布情况,可以明显看出纯化后的探针蛋白A,在实验组与对照组中都有分布;下面与蛋白A互作的未知蛋白在实验组中存在,在对照组中不存在,证明实验体系与结果准确有效。 Western blot检...
在清楚知道操作流程的前提下,弄清楚图中各个部分所代表的实验步骤,结合图中展示的结果进行分析,便可以看懂实验结果图。 文献案例1:Co-IP&GST pull down结果分析 Input:全细胞裂解液,诱饵蛋白与靶蛋白表达的检测确认。含有细胞内所有的蛋白,可认为是阳性对照。也就是处理完样本得到的细胞裂解液,在做IP实验之前,需要...
GST pull down实验结果怎么看啊 这张图的主要目的是为了证明GST-Atrogin-1-wt(野生型)和β-catenin在体外的相互作用, 上图是考马斯亮蓝染色的图,看划线的解说,说明实验中是用GST bead与纯化的GST蛋白或GST-Atrogin-1-wt共同孵育,用孵育后的bead来拉裂解液中的β-catenin 下图免疫印迹的,也就是western blot的...
观察曲线特征。pulldown跑胶图通常包括两个特征曲线,分别是载荷-位移曲线和应力-应变曲线,其中,载荷-位移曲线表示施加载荷时位移的变化情况,应力-应变曲线表示所受应力与应变之间的关系,观察这两条曲线的变化趋势和特点,可以了解样品受力时的性能和特性。
图 DNA Pull-down MS结果图 适用场景 筛选与已知DNA相互作用的未知蛋白 实验周期 DNA Pull-down的优点 1、可富集分析低丰度蛋白;2、探针制备简便,周期短;3、获得特异性蛋白与下游蛋白质检测技术兼容。DNA Pull-down的缺点 1、长链探针往往存在非特异结合现象;2、反应条件要求无核酸酶;3、体外实验,相对体内...
通过Western blot检测结果,我们可以看到GST-a蛋白和b蛋白所对应的条带,即表明了a蛋白和b蛋白因发生相互作用而被GST-a pull down(GST对照只显示一个条带)。 2.GST pull down实验步骤 GST-a融合蛋白的制备 1.GST-a融合蛋白的表达 (1)将目的蛋白与GST的重组质粒转化到BL21菌株中; (2)挑取单克隆到含有5ml LB...
1、鉴定的蛋白是直接作用的蛋白,非间接作用的复合体;2、GST标记可把一些难溶蛋白变成可溶蛋白,使实验变得更易操作;3、GSH谷胱甘肽偶联球珠亲和力强,洗脱纯度高。拉下实验(Pull-down)的缺点 1、两个非同一定位的蛋白可能因电荷或是强亲和力的原因造成假阳性,需用其他方法再次验证,例如Co-IP等;2、验证互作...