首先是input组,input组为阳性对照组,既未经pull down处理的试验组。为了表明实验体系没有问题。先看inp...
在这次实验中,通过GST pull down技术,可以有效地验证GST-Atrogin-1-wt和β-catenin之间的相互作用。具体来说,实验包括两部分,首先是通过考马斯亮蓝染色观察GST bead与GST蛋白或GST-Atrogin-1-wt的孵育效果,以及在孵育后的bead中拉取β-catenin。然后是免疫印迹技术,将相同胶上的蛋白通过转膜转移到...
这张图严格意义上需要加FLAG-EIL1的Input图;从你提供的图片pulldown实验结果图分析如下:MBP Beads 分别下拉MBP+FLAG-EIL1混合样品以及MBP-MED25+FLAG-EIL1混合样品,在最终的洗脱液里只有下拉MBP-MED25蛋白才能检测到FLAG-EIL1蛋白的存在(第二个泳道),表明了MED25与EIL1是相互作用的;第一个泳道的结果排除了MBP...
4558 1 03:00:07 App Pull-down+Co-IP+IP-MS大合集(11.19日下午培训) 2.3万 2 03:58 App 4分钟掌握Western blot实验原理 903 0 02:36 App 蛋白系列 GST pulldown实验 三分钟快速教程 7.6万 84 06:11 App 5分钟学会COIP原理与看懂COIP图,还不快来? 611 0 02:09 App DNA pull-down实验结果解读,前...
GST pull-down实验结果图怎么看 在清楚知道操作流程的前提下,弄清楚图中各个部分所代表的实验步骤,结合图中展示的结果进行分析,便可以看懂实验结果图。 文献案例1 结果解读 作者在GST的N端融合Sw-5b蛋白,在NSm21蛋白添加YFP标签便于免疫印迹。 GST pull-down+YFP IB组:表示GST pull-down实验后用YFP进行免疫印迹。
观察曲线特征。pulldown跑胶图通常包括两个特征曲线,分别是载荷-位移曲线和应力-应变曲线,其中,载荷-位移曲线表示施加载荷时位移的变化情况,应力-应变曲线表示所受应力与应变之间的关系,观察这两条曲线的变化趋势和特点,可以了解样品受力时的性能和特性。
GST pull down实验结果怎么看啊 这张图的主要目的是为了证明GST-Atrogin-1-wt(野生型)和β-catenin在体外的相互作用, 上图是考马斯亮蓝染色的图,看划线的解说,说明实验中是用GST bead与纯化的GST蛋白或GST-Atrogin-1-wt共同孵育,用孵育后的bead来拉裂解液中的β-catenin 下图免疫印迹的,也就是western blot的...
图 DNA Pull-down MS结果图 适用场景 筛选与已知DNA相互作用的未知蛋白 实验周期 DNA Pull-down的优点 1、可富集分析低丰度蛋白;2、探针制备简便,周期短;3、获得特异性蛋白与下游蛋白质检测技术兼容。DNA Pull-down的缺点 1、长链探针往往存在非特异结合现象;2、反应条件要求无核酸酶;3、体外实验,相对体内...
DNA pull-down实验首先针对靶标区域设计特异性DNA探针,探针经过脱硫生物素标记,跟偶联在磁珠上的链霉亲和素结合;细胞核提取物与磁珠-DNA探针孵育,作用蛋白质分子可以和DNA探针特异性结合;纯化出与靶DNA片段结合的蛋白复合体,经过洗涤可...
1、鉴定的蛋白是直接作用的蛋白,非间接作用的复合体;2、GST标记可把一些难溶蛋白变成可溶蛋白,使实验变得更易操作;3、GSH谷胱甘肽偶联球珠亲和力强,洗脱纯度高。拉下实验(Pull-down)的缺点 1、两个非同一定位的蛋白可能因电荷或是强亲和力的原因造成假阳性,需用其他方法再次验证,例如Co-IP等;2、验证互作...