GST-pull down 主要包括以下 3 部分：①利用基因重组技术构建带有 GST 标签的原核表②通过原核表达系统表达带有 GST 标签的融合蛋白；③利用 GST 亲和纯化柱进行蛋白纯化，获得高纯度的融合蛋白；再利用 GST 亲和纯化柱进行蛋白间的相互作用检测。实验结果 实验组GST-pull down第三列的实验结果可以看出KU-HIS，GST的...
【文献阅读】| 读图 | RIP、ChIP、CoIP、RNA pull down到底是些啥?| 大分子间相互作用(一) 6585 3 33:22 App RIP试剂盒实验操作步骤 1.6万 62 58:18 App GST pull-down检测技术及应用研究 4324 1 3:00:07 App Pull-down+Co-IP+IP-MS大合集(11.19日下午培训) 6426 6 10:36 App GST pull do...
Pull-down又叫做蛋白质体外结合实验,是在外源条件下检测蛋白质间相互作用的方法。基本原理:将靶蛋白-GST融合蛋白亲和固化在谷胱甘肽亲和树脂上,充当“诱饵蛋白”,目的蛋白溶液过柱,可从中捕获与之相互作用的结合蛋白,洗脱结合物后通过SDS-PAGE电泳分析,验证两种蛋白间的相互作用或筛选相应的目的蛋白;“诱饵蛋白”一般采用...
在pulldown实验中，通过检测实验结果中的条带bands来确定蛋白质与染色质交互作用的情况。在进行pulldown实验后，会经过电泳分离蛋白质-染色质复合物和未结合的蛋白质。然后，使用抗体检测特定蛋白质是否结合到染色质上，如果有，则抗体会与结合的复合物发生反应，并在凝胶上形成明显的条带。这些条带代表蛋...
🔍 通过Pull down实验,我们可以验证已知或预测的直接蛋白质-蛋白质或蛋白质-DNA/RNA相互作用。实验结果通常通过凝胶电泳和免疫印迹等技术进行检测和分析。 📊 在解读Pull down实验结果时,我们需要注意以下几个方面: 1️⃣ 诱饵蛋白质与目标蛋白质的相互作用是否明确且可重复。 2️⃣ 实验结果是否与预期的...
首先是input组，input组为阳性对照组，既未经pull down处理的试验组。为了表明实验体系没有问题。先看...
在这次实验中，通过GST pull down技术，可以有效地验证GST-Atrogin-1-wt和β-catenin之间的相互作用。具体来说，实验包括两部分，首先是通过考马斯亮蓝染色观察GST bead与GST蛋白或GST-Atrogin-1-wt的孵育效果，以及在孵育后的bead中拉取β-catenin。然后是免疫印迹技术，将相同胶上的蛋白通过转膜转移到...
为了控制鉴定结果的质量，通常会设置一定的假阳性率阈值。FDR值越低，说明蛋白质鉴定结果的准确性越高。以上四个参数是解读GST pull-down质谱分析结果的关键，它们共同决定了结果的准确性和可信度。理解这些参数的含义和重要性，对于正确解读实验结果，指导后续的实验设计和数据分析至关重要。
请教一下,RNA pulldown实验,为什么没有人用来筛相互作用的RNA呢?比如非编码RNA的底物mRNA,或者甚至用mRNA筛相互作用的非编码RNA?实验富集下来的,应该要比计算准确嘛。 2022-11-27·安徽 登录知乎,您可以享受以下权益: 更懂你的优质内容 更专业的大咖答主 ...
RNA pull-down实验是一种用于研究RNA和RNA结合蛋白质(RNA-binding proteins,RBPs)相互作用的常用技术之一。通过将RNA探针固定在固相 介质上,然后将该探针与细胞裂解液中的RNA结合蛋白反应,最终将结合到RNA上的蛋白质通过特定的方法进行检测。 当进行RNA pull-down实验时,可以根据不同的需求选择不同的下游检测方法。