电泳检测和Western blotting分析表达产物的特性.结果:SDS—PAGE电泳检测和Western blotting分析结果表明,表达的蛋白大小约为19kDa,符合预期结果,并能与抗PRRSV N蛋白的单克隆抗体发生特异性反应,说明表达的蛋白具有良好的免疫原性,可应用于临床PRRSV抗体的检测.结论:在大肠杆菌表达系统内成功表达了 PRRSV核衣壳蛋白(N蛋白...
PRRSV有N蛋白(核衣壳蛋白)、M蛋白、 GP2a、GP2b、GP3、GP4、GP5蛋白 7种结构 两种毒株间氨基酸的同源性为78%～81%。 PRRSV可分为2个型,欧洲型(LV株为代表株)和美洲型(ATCC-VR2332株为代表株) 主要特征是感染猪发热、厌食,妊娠母猪晚期流产、早产、产死胎、弱胎和木乃伊胎,各种年龄猪(特别是仔猪)呼吸障...
将构建好的表达质粒pET—E和pET—N转化到大肠杆菌BL-21中,通过诱导剂IPTG的诱导,在原核表达系统中得到了高效表达,重组蛋白的分子量分别为39KDa和31KDa左右.通过Western—blot蛋白免疫印记法检测蛋白活性,发现两种原核表达重组蛋白均能与PRRSV阳性血清发生反应,具有生物学活性,这就为下一步目的蛋白的纯化,蛋白高级结构...
图5为本发明实施例提供的以抗欧洲型prrsv-n蛋白兔血清为检测抗体进行his融合n蛋白的westernblot分析结果图,其中,m为170kda的蛋白marker,1为pet-32a-prrsv-orf7重组n蛋白,2为阴性对照; 图6为本发明实施例提供的以抗his鼠单克隆抗体为检测抗体进行his融合n蛋白的westernblot分析结果图,其中,m为170kda的蛋白marker,1...
PRRSV辽宁株N蛋白基因的克隆及序列分析
猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒(蓝耳)N真核表达蛋白 货号:LANDU-150 表达载体:杆状病毒载体 蛋白浓度:2mg/ml 蛋白纯度:大于95%(SDS-PAGE电泳) 缓冲 液:0.01M PBS, PH 7.4 效价:推荐ELISA包被浓度1:2000,不同体系下效价不同 包装规格:1 mg 保存条件:密封避光保存-30±10℃,避免反复冻融 ...
旨在通过慢病毒表达系统构建稳定表达猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV) N蛋白的Marc-145细胞系.以PRRSV SH1株感染性克隆质粒为模板,通过PCR扩增N基因,并将其克隆到慢病毒载体中,获得重组慢病毒质粒pSin-Ires-Puro-N,将重组质粒pSin-Ires-Puro-N与辅助质粒psPAS2,pMD2.G,pRSV-Rev共转染293T细胞进行慢病毒包装,获得...
(1:2000)可以特异地识别PRRSV感染的Marc145细胞中的N蛋白,重要的是该抗体可以与不同毒株反应;IFA检测显示,该纯化的抗体(1:100)可以检测PRRSV感染的细胞.因此,利用生物信息学软件预测的PRRSV N蛋白的抗原肽,能有效地应用于抗PRRSV N蛋白抗体的制备,制备的抗体不仅为研究PRRSV N蛋白奠定基础,而且为研究PRRSV与细胞...
N蛋白作为病毒中含量最丰富的蛋白,可以与 PRRSV的 Nsp9蛋白,Nsp10蛋白和病毒 RNA发生相互作用.然而作为一个磷酸化蛋白,其磷酸化修饰对于蛋白的功能的影响尚未明确,并且 N蛋白磷酸化位点也没有得到鉴定.为了研究 N蛋白磷酸化修饰是否能对病毒的复制或...