分析了PRRSV结构蛋白GP5和M的二级结构抗原指数、抗原性、亲水性、表面可及性以及潜在中和表位等参数,选取GP5的47~61、143~156和186~199位氨基酸,M蛋白的63~70、133~146和156~169位氨基酸作为免疫原,构建带接头序列的GP5/M中和表位融合...
M蛋白长度大约190氨基酸,19kDa,并且是非糖基化。核壳体蛋白N由ORF7编码。来自欧洲和北美的PRRSV分离株的基因组序列的分析,以及其与单克隆抗体的反应性已经证实了它们代表两种不同的抗原类型。这些洲的分离株在遗传上不同并且从共同祖先在较早以前分离(MwWm^/ze^/.,/卯5)。动脉炎病毒(arteriviruses)的基因组组成...
IFA结果显示GP5和M蛋白均在SF9细胞内表达;WesternBlot结果显示SF9细胞表达的GP5和M蛋白大小与理论值一致。测定第三代重组杆状病毒滴度,按照MOI为4接种悬浮培养的HighFive细胞,48h后收集培养上清,经20%蔗糖垫超速离心浓缩和蔗糖密度梯度离心进行纯化,WesternBlot结果显示可与PRRSV-1GP5蛋白抗体产生特异性反应,与理论值...
繁殖呼吸综合征病毒地方分离PRRSVSCMSMN蛋白基因 系统标签: 病毒综合征繁殖克隆分离序列 摘要 猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)病毒属动脉炎病毒科动脉炎病毒属,引起母猪繁殖障碍的重 要病原之一,该病自发现以来已给世界各国养猪业造成了巨大的经济损失。 本实验通过流行病学调查,从四川省某猪场发生繁殖障碍的母猪血清中,用MA...
【摘要】以PRRSV FJ-1a株为模板,采用RT-PCR法分别扩增出GP2a/GP2b-3、GP3、GP4、GP5和M蛋白基因片段,双酶切后插入穿梭质粒pDC316.利用AdMaxTM法,将5个重组穿梭质粒分别与腺病毒辅助质粒共转染293细胞,得到重组腺病毒Ad-GP2a/GP2b-3、Ad-GP3、Ad-GP4、Ad-GP5和Ad-M.重组腺病毒滴度为107.7～109.0TCID50·...
PRRSV国内流行毒株的分离鉴定及结构基因的分析
并且与采用蔗糖密度梯度离心法纯化的prrsv形态一致,粒子呈圆形或者椭圆形,具有双层膜结构,直径大小在40nm-100nm,采用抗prrsvm蛋白的兔血清进行免疫电镜观察,结果显示myc和his双标记型vlps与天然病毒一样都能够被金颗粒标记,这表明n蛋白的表达不影响标记型vlps的组装,以vlps作为包被抗原进行间接elisa检测,结果显示标记型...
GP5是PRRSV 的主要结构蛋白之一,能诱导产生具有保护作用的中和抗体,在体液免疫过程中发挥一定作用。M蛋白是包括PRRSV 在内的动脉炎病毒中最保守的蛋白,具有很强的免疫原性。N 蛋白是PRRSV 免疫原性最强的结构蛋白,然而其抗体不是中和抗体,不具有保护性。由于其产生的抗体持续时间长,因此检测N 蛋白抗原成为PRRSV 感染...
透射电镜观察结果表明,Myc-GP5和His-M能够自动组装成VLPs,并且与天然PRRSV形态一致,具有双层膜结构,直径大小在40-60 nm.采用抗M蛋白的家兔血清进行免疫电镜观察,结果显示,Myc和His双标记型VLPs与天然病毒一样都能够被金颗粒标记,而且共感染的N蛋白不影响标记型VLPs的组装.本研究首次采用昆虫杆状病毒表达系统成功制备...